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產(chǎn)品名稱：水質(zhì)（糞）大腸菌群檢驗(yàn)紙片
產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格：
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品類型 | 包裝規(guī)格 |
|---|---|---|
| 060030 | 紙片 | 10 份/盒（10mL 水樣量紙片 5 袋，1mL 水樣量紙片 10 袋） |
| 060070 | 紙片 | 10 份/盒（1mL 水樣量紙片 15 袋） |
產(chǎn)品用途：廣泛應(yīng)用于生活飲用水、飲用天然礦泉水的水源水、地表水和廢水中總大腸菌群和糞大腸菌群的檢測(cè)。
檢驗(yàn)原理：按 MPN法，將一定量的乳糖、指示劑（溴甲酚紫和 2,3, 5-氯化三苯基四氮唑即 TTC）以及營(yíng)養(yǎng)成分等吸附于一定面積的無菌濾紙上，在特定的溫度（37℃ 或 44.5℃）培養(yǎng)24h，當(dāng)細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖時(shí)，產(chǎn)酸使 PH值降低，溴甲酚紫指示劑由紫色變黃色。同時(shí)，產(chǎn)氣過程相應(yīng)的脫氫酶在適宜的 PH值范圍內(nèi)，催化底物脫氫還原 TTC 形成紅色的不溶性三苯甲臜（TTF），即可在產(chǎn)酸后的黃色背景下顯示出紅色斑點(diǎn)（或紅暈）。通過上述指示劑的顏色變化就可對(duì)是否產(chǎn)酸產(chǎn)氣作出判斷，從而確定是否有總大腸菌群或糞大腸菌群存在，再通過查 MPN表 就可得出相應(yīng)總大腸菌群或糞大腸菌群的濃度值。
水質(zhì)（糞）大腸菌群檢驗(yàn)紙片使用方法：
1、接 種：每個(gè)樣品按三個(gè)10倍遞減的不同接種量接種，每個(gè)接種量分別接種5袋紙片，共接種15袋紙片。
清潔水樣（選用產(chǎn)品編號(hào)為 060030 的紙片），接種水樣總量為55.5mL, 10mL水樣量紙片5袋，每袋接種水樣10mL，1mL水樣量紙片10張，其中5張各接種水樣1mL，另5袋各接種 1：10的稀釋水樣1mL。
受污染水樣（選用產(chǎn)品編號(hào)為 060070 的紙片），接種3個(gè)不同稀釋度的1mL稀釋水樣各5袋。接種水樣應(yīng)均勻滴加在紙片上，紙片充分浸潤(rùn)、吸收水樣，然后用手在塑膜袋外側(cè)輕輕撫平，做好標(biāo)記，袋口朝上豎直放置于恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
2、培養(yǎng)：檢測(cè)總大腸菌群時(shí)，在36℃-38℃條件下培養(yǎng)18~24h后觀察結(jié)果；檢測(cè)糞大腸菌群時(shí)，在44.5±0.5℃的條件下培養(yǎng)18~24h 后觀察結(jié)果
3、結(jié)果判讀：
（1）紙片上出現(xiàn)紅斑或紅暈且周圍變黃，為陽性。
（2）紙片全片變黃，無紅斑或紅暈，為陽性。
（3）紙片部分變黃，無紅斑或紅暈，為陰性。
（4）紙片的紫色背景上出現(xiàn)紅斑或紅暈，而周圍不變黃，為陰性。
（5）紙片無變化，為陰性。
4、結(jié)果報(bào)告：根據(jù)不同接種量的陽性紙片數(shù)量，查相應(yīng)的 MPN 表（見 HJ 755-2015 附錄 B），按公式（1）換算并報(bào)告 1L水樣中總大腸菌群或糞大腸菌群數(shù)：
公式（1）：C=100×M/Q
C-水樣總大腸菌群或糞大腸菌群濃度（MPN/L）
M-查 MPN 表得到的 MPN 值（MPN/100mL）
Q-實(shí)際水樣最大接種量（mL）
100-為 10×10mL，其中，10 將 MPN 值的單位 MPN/100mL 轉(zhuǎn)換為 MPN/L，10mL 為 MPN 表中最大接種量。
5、結(jié)果表示：測(cè)定結(jié)果保留二位有效數(shù)字，大于等于 100 時(shí)以科學(xué)計(jì)數(shù)法表示，結(jié)果的單位為 MPN/L。平均值以幾何平均計(jì)算。
水質(zhì)（糞）大腸菌群檢驗(yàn)紙片質(zhì)量控制：
1，理化指標(biāo)：加水后，紙片 pH 值 7.0-7.3。
2，本品接種下列菌株，置于溫箱中培養(yǎng) 18-24h，結(jié)果如下：
| 指標(biāo) | 質(zhì)控菌株及編號(hào) | 培養(yǎng)溫度 | 特征性反應(yīng) |
|---|---|---|---|
| 生長(zhǎng)率 | 大腸埃希氏菌ATCC25922 | 36～38℃ | 紙片變黃，并在黃色背景上呈現(xiàn)紅點(diǎn)或片狀紅暈。 |
| 金黃色葡萄球菌ATCC6538 | 紙片保持紫色不變 | ||
| 大腸埃希氏菌ATCC25922 | 44.5±0.5℃ | 紙片變黃，并在黃色背景上呈現(xiàn)紅點(diǎn)或片狀紅暈。 | |
| 產(chǎn)氣腸桿菌ATCC13048 | 紙片保持紫色不變 |
儲(chǔ)存條件與保質(zhì)期：2-8℃避光貯存，并注意防潮，保質(zhì)期一年，如發(fā)現(xiàn)紙片變?yōu)榉奂t色即為失敗。
注意事項(xiàng)：
1、水樣采集后 2h 內(nèi)檢測(cè)，否則，需 10℃以下冷藏并 6h 內(nèi)送檢，實(shí)驗(yàn)室接樣后，應(yīng)將樣品放入 0-4℃冰箱并 2h 內(nèi)測(cè)定。
2、為避免紙片加入水樣后，短時(shí)間內(nèi)變黃或退色，如果采集水樣含有余氯或經(jīng)過加氯處理，需在采樣瓶滅菌前加入硫代硫酸鈉（0.1g/mL）0.2mL （10mg 硫代硫酸鈉可保證去除水樣中 1.5mg 余氯，硫代硫酸鈉用量克根據(jù)水樣實(shí)際余氯量調(diào)整）；如果采集水樣重金屬含量較高，需在采樣瓶滅菌前加入乙二胺四乙酸二鈉（EDTA- Na2）溶液（0.15g/mL）0.6mL，以消除干擾。酸性樣品，需在分析前按無菌操作要求調(diào)節(jié)樣品的 pH 值至 7.0-8.0。
3、檢測(cè)糞大腸菌群時(shí)，紙片接種后應(yīng)立即放置于 44.5±0.5℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，在常溫下放置過久將影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
4、質(zhì)檢報(bào)告可以登錄環(huán)凱網(wǎng)站 http://www.knowper.cn， 打開“質(zhì)檢報(bào)告”頁(yè)面，輸入產(chǎn)品批號(hào)下載。
廢物處理：檢測(cè)之后帶菌物品置于121℃下高壓滅菌30分鐘后處理。
執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：Q/HK 0706-廣東環(huán)凱微生物科技有限公司企業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 微生物檢驗(yàn)卡
水質(zhì)（糞）大腸菌群檢驗(yàn)紙片參考文獻(xiàn)：
1，《水和廢水監(jiān)測(cè)分析方法（第四版）》
2，GB/T 5750.12 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)法
3，GB 85386 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 飲用天然礦泉水檢驗(yàn)方法
4，HJ 755 水質(zhì) 總大腸菌群和糞大腸菌群的測(cè)定 紙片快速法
