產(chǎn)品名稱：抗防腐劑型大腸菌群檢驗紙片
產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格：
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品類型 | 包裝規(guī)格 |
|---|---|---|
| 060090 | 紙片 | 10份/盒（9袋/份） |
產(chǎn)品用途：用于含有防腐劑（包括苯甲酸、山梨酸及其鹽類）的食品、飲料及保健品中大腸菌群的檢測。
檢驗原理：以濾紙上吸附的營養(yǎng)物質作為大腸菌群的培養(yǎng)基質，大腸菌群可發(fā)酵培養(yǎng)基中乳糖產(chǎn)酸，使溴甲粉紫指示劑由紫變黃，通過細菌還原培養(yǎng)培養(yǎng)基中的TTC，使之形成易于辨別的紅色菌落，防腐劑解抑劑可消除防腐劑（2.0g/L苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸 、山梨酸鉀）的干擾；包裝通過無菌處理，可直接食品、飲料飲用純凈水中大腸菌群的檢測。
抗防腐劑型大腸菌群檢驗紙片使用方法：
1、 樣品處理：以無菌操作將檢樣25mL（或25g）放于含有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(nèi)（瓶內(nèi)預置適當數(shù)量的玻璃珠），經(jīng)充分振蕩或研磨做成1：:10的均勻稀釋液。固體樣品最好用均質器，以8000-10000r/min的速度處理1min，做成1：10的均勻稀釋液；用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL，注入含有9mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi)，制成1:100的均勻稀釋液，按上一步操作依次做成10倍遞增稀釋液。
2、 接種：根據(jù)食品衛(wèi)生標準要求或對樣品污染情況的估計，選擇適宜稀釋度的稀釋液，吸取三份10mL分別涂布于3袋大紙片；三份1mL分別涂布于3袋小紙片；另取1mL再稀釋10倍后，吸取三份1mL分別涂布于3袋小紙片。而后用手將檢驗紙片輕輕壓平；袋口朝上豎直于恒溫培養(yǎng)箱（35-37℃）內(nèi)培養(yǎng)18-24h，然后觀察結果。
3、 結果判讀：陰性結果：紙片保持紫藍色不變，無論有否紅色斑點或紅暈 均判為大腸菌群陰性。陽性結果：紙片上呈現(xiàn)紅色斑點或紅暈，其周圍變黃或整個紙片變黃均判為大腸菌群陽性。
4、結果報告：根據(jù)陽性反應的紙片數(shù)查相應的大腸菌群MPN表，得數(shù)據(jù)乘以稀釋倍數(shù)，以此為結果，報告每100mL（g）檢樣內(nèi)大腸菌群的MPN值。
抗防腐劑型大腸菌群檢驗紙片質量控制：
1、理化指標：加水后，紙片PH值7.0±0.2。
2、本品接種下列菌株，置于36±1℃溫箱中培養(yǎng)24-48h,結果如下：
| 指標 | 質控菌株及編號 | 生長情況 | 特征性反應 |
|---|---|---|---|
| 生長率 | 大腸埃希氏菌 ATCC25922 | 良好 | 紙片變黃，并在黃色背景上呈現(xiàn)紅點或片狀紅暈。 |
| 金黃色葡萄球菌 ATCC6538 | 不長 | — |
儲存條件與保質期：2-8℃避光貯存，并注意防潮，保質期一年，如發(fā)現(xiàn)紙片變?yōu)榉奂t色即為失敗。
注意事項：
1、檢查食（飲）品時，凡酸性檢樣應以100g/L無菌碳酸鈉溶液調PH至中性后，方可進行稀釋接種。
2、可疑結果的判斷：大腸菌群菌量的多少與結果的顯示密切相關，可出現(xiàn)3種不同現(xiàn)象：（1）菌量較大（≧103cfu/mL），整個紙片也變黃，但有小而密集的紅色斑點；（2）菌量適中（102-103cfu/mL）,整個紙片也變黃，但有小而密集的紅色斑點菌量較少（≦102cfu/mL），紙片可呈紫藍色，并有散在或較密集的紅色斑點，其周圍變黃。因此菌量較大時，可能出現(xiàn)可疑現(xiàn)象。此時應通過加大樣品稀釋度或進一步做復發(fā)酵進行證實。其它可疑現(xiàn)象也可通過復發(fā)酵實驗進行確認。
3、確認試驗的方法：進行確認試驗，用滅菌鑷子無菌操作將可疑紙片移種到乳糖發(fā)酵管，置37℃24h培養(yǎng)后，對其產(chǎn)酸產(chǎn)氣者判為大腸菌群陽性，否則判為陰性。
廢物處理：檢測之后帶菌物品置于121℃下高壓滅菌30分鐘后處理。
執(zhí)行標準：Q/HK 0706-2011 廣東環(huán)凱微生物科技有限公司企業(yè)標準 微生物檢驗卡
