噬菌體是什么?噬菌體如何進(jìn)行檢測(cè)
發(fā)布時(shí)間:2024-07-24 瀏覽次數(shù):746
噬菌體是一類細(xì)菌特異性的病毒,它有典型的病毒形態(tài)和結(jié)構(gòu)。 噬菌體對(duì)宿主有高度的特異性,噬菌體的宿主范圍是鑒別菌株的一個(gè)有用的特性,但并不是一個(gè)不變的特性。噬菌體的作用方式,是以尾鞘吸附到宿主細(xì)胞特定的受點(diǎn)上,向菌體內(nèi)注射RNA,并在菌體內(nèi)復(fù)制子代,最終類似蛭弧菌溶解宿主的方式,釋放子代。噬菌體不能在停止新陳代謝的宿主內(nèi)生長(zhǎng)繁殖。
噬菌體的檢測(cè)
噬菌體的分離可用平板接種法或肉湯培養(yǎng)物的裂解法。噬菌體的測(cè)定目前已普遍采用雙層瓊平板法。在這些方法中所采用的宿主菌均為新陳代謝中的細(xì)菌,一旦宿主菌停止新陳代謝,則噬菌體的生長(zhǎng)繁殖同時(shí)停止。噬菌體的生長(zhǎng)溫度為 37℃。用檢查噬菌體和細(xì)菌素的方法,蛭弧菌則不能生長(zhǎng)形成噬菌斑,反之用檢查蛭弧菌的方法檢查噬菌體,也不能形成噬菌斑。
平板接種效率是檢測(cè)噬菌體顆粒在接種平板后實(shí)際形成噬菌斑的比例數(shù)的常用方法。它取決于噬菌體顆粒吸附敏感宿主細(xì)胞的能力和被感染宿主釋放噬菌體的能力。影響平板接種效率的因素很多,如培養(yǎng)物中死菌的存在,以及培養(yǎng)基的成份等。
噬菌體的形態(tài)與結(jié)構(gòu)
噬菌體不能在光學(xué)顯微鏡下觀察到,因此,對(duì)噬菌體形態(tài)、結(jié)構(gòu)的認(rèn)識(shí),得從電子顯微鏡開始,這一點(diǎn)與細(xì)菌素是相同的。噬菌體個(gè)體叫做病毒粒子,它的形狀有3種,包括蝌蚪形、微球形和纖絲形。
目前已知大部分噬菌體是屬于蝌蚪形,它由頭和尾兩部分組成。噬菌體尾部的結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜,是感染、吸附、侵入宿主細(xì)胞的器官。蛭弧菌、細(xì)菌素不具有這種結(jié)構(gòu)上的特殊分化感染器官。按其尾部形態(tài)特征可分為兩類,一類尾部較長(zhǎng),有伸縮性尾鞘,如T2、T4和T6等;另一類尾部無(wú)伸縮性,并呈現(xiàn)不同程度的易變性,如T1、T3、T5、T7和λ噬菌體等。
以T2噬菌體為例,頭呈六角棱柱體,頭長(zhǎng)95nm,寬65nm。外殼是蛋白質(zhì),由2000個(gè)蛋白質(zhì)亞單位組成。亞單位的分子量為80kD,外殼厚2.5~3nm,具有彈性、能伸縮,有助于核酸“注射”到宿主菌體內(nèi)。尾部至少有尾鞘、尾髓、基板、尾絲、尾針等幾部分組成。
微球形噬菌體較小,約 20~60nm,電鏡可見到呈二十面體的結(jié)構(gòu),沒(méi)有尾部或突起。φ174在二十面體的每個(gè)頂角附有一紐結(jié)結(jié)構(gòu)。噬菌體顆粒的蛋白質(zhì)外殼包著核酸。
纖絲形噬菌體結(jié)構(gòu)較為簡(jiǎn)單,呈彎曲絲狀,長(zhǎng)度可達(dá)到600~800nm,沒(méi)有吸附器官,可直接穿過(guò)胞壁而侵染宿主。
噬菌體的應(yīng)用
噬菌體分型技述目前已廣泛的被采用。1938年,顏春暉首次報(bào)道傷寒沙門菌的Vi噬菌體分型法,這個(gè)方法后來(lái)成為噬菌體作細(xì)菌分型的一個(gè)模型。噬菌體分型技術(shù)在流行病學(xué)追蹤傳染源方面有獨(dú)特的作用。如弧菌噬菌體分型、沙門菌噬菌體分型、金葡菌噬菌體分型、 白喉?xiàng)U菌噬菌體分型、綠膿桿菌噬菌體分型等。
噬菌體對(duì)宿主細(xì)胞的吸附有很強(qiáng)的特異性,有人利用這一特性,用噬菌體治療某些感染性疾病。如利用綠膿桿菌噬菌體可有效的抑制綠膿菌的感染。用藥途徑以體表感染外用效果最佳,次之腔道噴霧,以口服治療效果最差。何曉青等近年來(lái)利用噬菌體鑒定腸桿菌科細(xì)菌得到了滿意的結(jié)果,為沙門菌的檢測(cè)提供了極大的方便。噬菌體作為生物材料等在生物研究中已廣泛應(yīng)用,如大腸桿菌噬菌體等。
來(lái)源:微生物安全與健康網(wǎng)
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