GB4789.28-2024參比培養(yǎng)基質(zhì)控解析及圖譜——TSA篇
發(fā)布時(shí)間：2024-05-15 瀏覽次數(shù)：3104
隨著2024年年初GB4789.28-2024重磅發(fā)布，隨之各地掀起了標(biāo)準(zhǔn)學(xué)習(xí)的熱潮，參比培養(yǎng)基質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)的加入，也成為了此標(biāo)準(zhǔn)的一大亮點(diǎn)，作為在此標(biāo)準(zhǔn)中起著絕對(duì)“標(biāo)桿”作用的參比培養(yǎng)基，其質(zhì)控方法、質(zhì)控要求也受到業(yè)內(nèi)同仁的一致追捧，今天小編就跟大家一起來(lái)聊一聊參比培養(yǎng)基的質(zhì)控。文章附有培養(yǎng)基質(zhì)控菌高清無(wú)碼圖片奧，一定要看到底！
參比培養(yǎng)基是為保證食品微生物檢驗(yàn)用培養(yǎng)基的質(zhì)量而存在的，凡瓊脂培養(yǎng)基，無(wú)論是非選擇性的還是選擇性的，其涉及生長(zhǎng)率的測(cè)試均需用到參比培養(yǎng)基。參比培養(yǎng)基作為回收率計(jì)算的“分母”，其質(zhì)量?jī)?yōu)劣對(duì)培養(yǎng)基的驗(yàn)收工作至關(guān)重要。今天就胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基（Trypticase Say Agar,TSA)參比培養(yǎng)基的質(zhì)控進(jìn)行解析，一起來(lái)看看吧。
第一，需核對(duì)參比培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)配方，如圖所示；
第二，參比培養(yǎng)基需由具備相應(yīng)檢驗(yàn)?zāi)芰Γ⑷〉猛ㄟ^(guò)國(guó)家認(rèn)證認(rèn)可資質(zhì)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的檢測(cè)報(bào)告。
第三，應(yīng)滿足相關(guān)理化指標(biāo)要求：外觀要求為淡黃色粉末，滅菌后為淡黃色透明膠體。PH值控制在滅菌后冷卻至25℃時(shí)7.3±0.2的范圍內(nèi)。
第四，微生物指標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的TSA參比培養(yǎng)基測(cè)試菌株為10株，對(duì)于參比培養(yǎng)基的微生物促生長(zhǎng)檢測(cè)項(xiàng)目，GB4789.28中規(guī)定的質(zhì)控評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)中的要求如下：
如何操作呢？
GB4789.28-2024中原文“參比培養(yǎng)基具體檢驗(yàn)方法可參考6.1或6.2.3”，那么6.1和6.2.3分別是什么呢？章節(jié)6.1為“非選擇性分離和計(jì)數(shù)固體培養(yǎng)基目標(biāo)菌生長(zhǎng)率定量測(cè)試方法”對(duì)非選擇性的參比培養(yǎng)基TSA具有操作上的指導(dǎo)意義！章節(jié)6.2.3為“非目標(biāo)菌（特異性）定性測(cè)試方法”，而TSA/SDA/MRS中測(cè)試菌種均涉及其促生長(zhǎng)能力，為相應(yīng)培養(yǎng)基的目標(biāo)菌，在此6.2.3測(cè)試方法不適用于參比培養(yǎng)基的測(cè)試方法。
測(cè)試方法具體操作如下：
1、工作菌懸液的制備：將標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株、儲(chǔ)備菌株或工作菌株接種到非選擇性肉湯培養(yǎng)過(guò)夜或采用其他方法，制備10倍系列稀釋的菌懸液。進(jìn)行生長(zhǎng)率測(cè)試時(shí)，細(xì)菌和酵母菌每平板的接種水平為50CFU~250CFU，霉菌每平板的接種水平為30CFU~150CFU。
2、接種：選擇適宜稀釋度的工作菌懸液0.1mL，均勻涂布接種于待測(cè)平板和參比平板。每一稀釋度接種兩個(gè)平板。也可使用螺旋涂布法或傾注法進(jìn)行接種，并按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的條件培養(yǎng)。
【傾注法，菌落長(zhǎng)在瓊脂內(nèi)部和表面，其形態(tài)不便統(tǒng)一。這里不使用傾注法，而選用螺旋法，也可使用涂布法。個(gè)人覺(jué)得，傾注法的最佳使用范疇，可以在驗(yàn)收平板計(jì)數(shù)法用的培養(yǎng)基時(shí)考慮使用此法驗(yàn)收，而當(dāng)培養(yǎng)基做為劃線分離或者涂布使用時(shí)，優(yōu)先考慮涂布或螺旋法驗(yàn)收培養(yǎng)基?！?/em>
為了直觀了解到其測(cè)試菌株在TSA參比培養(yǎng)基上的具體菌落形態(tài)，小編現(xiàn)將試驗(yàn)菌落特征圖列于下表：
| 菌株名稱及編號(hào) | 培養(yǎng)條件 | 接種量/cfu | 菌落特征圖 | 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 |
|---|---|---|---|---|
| 莫氏克羅諾桿菌CMCC（B）45407 | 25℃，48h | 117 |  | 生長(zhǎng)良好，菌落黃色，圓形，表面光滑，濕潤(rùn)。 |
| 大腸埃希氏菌CMCC（B）44102 | 36℃，24h | 99 |  | 生長(zhǎng)良好，菌落灰白色，圓形，表面光滑，濕潤(rùn) |
| 金黃色葡萄球菌CMCC（B）26003 | 36℃，24h | 54 |  | 生長(zhǎng)良好，菌落淡黃色，圓形 |
| 枯草芽孢桿菌CMCC（B）63501 | 36℃，24h | 71 |  | 生長(zhǎng)良好，菌落灰白色，圓形，干燥 |
| 白色念珠菌CMCC(B）98001 | 28℃，72h | 206 |  | 生長(zhǎng)良好，菌落白色，圓形，表面光滑，濕潤(rùn) |
| 黑曲霉CMCC(F）98003 | 28℃，72h | 39 |  | 生長(zhǎng)良好，產(chǎn)黑色孢子 |
| 糞腸球菌CMCC(B)32480 | 36℃，24h | 159 |  | 生長(zhǎng)良好，菌落白色，圓形 |
| 藤黃微球菌CMCC(B)28001 | 36℃，48h | 119 |  | 生長(zhǎng)良好，菌落淺黃色，圓形 |
| 嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌CMCC(B)63509 | 56℃，24h | 71 |  | 灰白色，圓形，表面光滑，濕潤(rùn) |
