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GB4789.28-2024參比培養(yǎng)基質控解析及圖譜——TSA篇

發(fā)布時間:2024-05-15    瀏覽次數(shù):3105

隨著2024年年初GB4789.28-2024重磅發(fā)布,隨之各地掀起了標準學習的熱潮,參比培養(yǎng)基質控標準的加入,也成為了此標準的一大亮點,作為在此標準中起著絕對“標桿”作用的參比培養(yǎng)基,其質控方法、質控要求也受到業(yè)內同仁的一致追捧,今天小編就跟大家一起來聊一聊參比培養(yǎng)基的質控。文章附有培養(yǎng)基質控菌高清無碼圖片奧,一定要看到底!

參比培養(yǎng)基是為保證食品微生物檢驗用培養(yǎng)基的質量而存在的,凡瓊脂培養(yǎng)基,無論是非選擇性的還是選擇性的,其涉及生長率的測試均需用到參比培養(yǎng)基。參比培養(yǎng)基作為回收率計算的“分母”,其質量優(yōu)劣對培養(yǎng)基的驗收工作至關重要。今天就胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(Trypticase Say Agar,TSA)參比培養(yǎng)基的質控進行解析,一起來看看吧。

第一,需核對參比培養(yǎng)基標準配方,如圖所示;

第二,參比培養(yǎng)基需由具備相應檢驗能力,并取得通過國家認證認可資質檢驗機構出具的檢測報告。

第三,應滿足相關理化指標要求:外觀要求為淡黃色粉末,滅菌后為淡黃色透明膠體。PH值控制在滅菌后冷卻至25℃時7.3±0.2的范圍內。

第四,微生物指標,標準中規(guī)定的TSA參比培養(yǎng)基測試菌株為10株,對于參比培養(yǎng)基的微生物促生長檢測項目,GB4789.28中規(guī)定的質控評定標準中的要求如下:

如何操作呢?

GB4789.28-2024中原文“參比培養(yǎng)基具體檢驗方法可參考6.1或6.2.3”,那么6.1和6.2.3分別是什么呢?章節(jié)6.1為非選擇性分離和計數(shù)固體培養(yǎng)基目標菌生長率定量測試方法對非選擇性的參比培養(yǎng)基TSA具有操作上的指導意義!章節(jié)6.2.3為“非目標菌(特異性)定性測試方法”,而TSA/SDA/MRS中測試菌種均涉及其促生長能力,為相應培養(yǎng)基的目標菌,在此6.2.3測試方法不適用于參比培養(yǎng)基的測試方法。

測試方法具體操作如下:

1、工作菌懸液的制備:將標準儲備菌株、儲備菌株或工作菌株接種到非選擇性肉湯培養(yǎng)過夜或采用其他方法,制備10倍系列稀釋的菌懸液。進行生長率測試時,細菌和酵母菌每平板的接種水平為50CFU~250CFU,霉菌每平板的接種水平為30CFU~150CFU。

2、接種:選擇適宜稀釋度的工作菌懸液0.1mL,均勻涂布接種于待測平板和參比平板。每一稀釋度接種兩個平板。也可使用螺旋涂布法或傾注法進行接種,并按標準規(guī)定的條件培養(yǎng)。
【傾注法,菌落長在瓊脂內部和表面,其形態(tài)不便統(tǒng)一。這里不使用傾注法,而選用螺旋法,也可使用涂布法。個人覺得,傾注法的最佳使用范疇,可以在驗收平板計數(shù)法用的培養(yǎng)基時考慮使用此法驗收,而當培養(yǎng)基做為劃線分離或者涂布使用時,優(yōu)先考慮涂布或螺旋法驗收培養(yǎng)基。】

為了直觀了解到其測試菌株在TSA參比培養(yǎng)基上的具體菌落形態(tài),小編現(xiàn)將試驗菌落特征圖列于下表:

菌株名稱及編號 培養(yǎng)條件 接種量/cfu 菌落特征圖 實驗結果
莫氏克羅諾桿菌CMCC(B)4540725℃,48h117莫氏克羅諾桿菌CMCC(B)45407 生長良好,菌落黃色,圓形,表面光滑,濕潤。
大腸埃希氏菌CMCC(B)4410236℃,24h99大腸埃希氏菌CMCC(B)44102 生長良好,菌落灰白色,圓形,表面光滑,濕潤
金黃色葡萄球菌CMCC(B)2600336℃,24h54金黃色葡萄球菌CMCC(B)26003 生長良好,菌落淡黃色,圓形
枯草芽孢桿菌CMCC(B)6350136℃,24h71枯草芽孢桿菌CMCC(B)63501 生長良好,菌落灰白色,圓形,干燥
白色念珠菌CMCC(B)9800128℃,72h206白色念珠菌CMCC(B)98001 生長良好,菌落白色,圓形,表面光滑,濕潤
黑曲霉CMCC(F)9800328℃,72h39黑曲霉CMCC(F)98003 生長良好,產黑色孢子
糞腸球菌CMCC(B)3248036℃,24h159糞腸球菌CMCC(B)32480 生長良好,菌落白色,圓形
藤黃微球菌CMCC(B)2800136℃,48h119藤黃微球菌CMCC(B)28001 生長良好,菌落淺黃色,圓形
嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌CMCC(B)6350956℃,24h71嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌CMCC(B)63509 灰白色,圓形,表面光滑,濕潤

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