產(chǎn)品名稱：抗防腐劑型大腸菌群檢驗(yàn)紙片
產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格：
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品類型 | 包裝規(guī)格 |
|---|---|---|
| 060090 | 紙片 | 10份/盒（9袋/份） |
產(chǎn)品用途：用于含有防腐劑（包括苯甲酸、山梨酸及其鹽類）的食品、飲料及保健品中大腸菌群的檢測(cè)。
檢驗(yàn)原理：以濾紙上吸附的營養(yǎng)物質(zhì)作為大腸菌群的培養(yǎng)基質(zhì)，大腸菌群可發(fā)酵培養(yǎng)基中乳糖產(chǎn)酸，使溴甲粉紫指示劑由紫變黃，通過細(xì)菌還原培養(yǎng)培養(yǎng)基中的TTC，使之形成易于辨別的紅色菌落，防腐劑解抑劑可消除防腐劑（2.0g/L苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸 、山梨酸鉀）的干擾；包裝通過無菌處理，可直接食品、飲料飲用純凈水中大腸菌群的檢測(cè)。
抗防腐劑型大腸菌群檢驗(yàn)紙片使用方法：
1、 樣品處理：以無菌操作將檢樣25mL（或25g）放于含有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶?jī)?nèi)（瓶?jī)?nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠），經(jīng)充分振蕩或研磨做成1：:10的均勻稀釋液。固體樣品最好用均質(zhì)器，以8000-10000r/min的速度處理1min，做成1：10的均勻稀釋液；用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL，注入含有9mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi)，制成1:100的均勻稀釋液，按上一步操作依次做成10倍遞增稀釋液。
2、 接種：根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)悠肺廴厩闆r的估計(jì)，選擇適宜稀釋度的稀釋液，吸取三份10mL分別涂布于3袋大紙片；三份1mL分別涂布于3袋小紙片；另取1mL再稀釋10倍后，吸取三份1mL分別涂布于3袋小紙片。而后用手將檢驗(yàn)紙片輕輕壓平；袋口朝上豎直于恒溫培養(yǎng)箱（35-37℃）內(nèi)培養(yǎng)18-24h，然后觀察結(jié)果。
3、 結(jié)果判讀：陰性結(jié)果：紙片保持紫藍(lán)色不變，無論有否紅色斑點(diǎn)或紅暈 均判為大腸菌群陰性。陽性結(jié)果：紙片上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)或紅暈，其周圍變黃或整個(gè)紙片變黃均判為大腸菌群陽性。
4、結(jié)果報(bào)告：根據(jù)陽性反應(yīng)的紙片數(shù)查相應(yīng)的大腸菌群MPN表，得數(shù)據(jù)乘以稀釋倍數(shù)，以此為結(jié)果，報(bào)告每100mL（g）檢樣內(nèi)大腸菌群的MPN值。
抗防腐劑型大腸菌群檢驗(yàn)紙片質(zhì)量控制：
1、理化指標(biāo)：加水后，紙片PH值7.0±0.2。
2、本品接種下列菌株，置于36±1℃溫箱中培養(yǎng)24-48h,結(jié)果如下：
| 指標(biāo) | 質(zhì)控菌株及編號(hào) | 生長情況 | 特征性反應(yīng) |
|---|---|---|---|
| 生長率 | 大腸埃希氏菌 ATCC25922 | 良好 | 紙片變黃，并在黃色背景上呈現(xiàn)紅點(diǎn)或片狀紅暈。 |
| 金黃色葡萄球菌 ATCC6538 | 不長 | — |
儲(chǔ)存條件與保質(zhì)期：2-8℃避光貯存，并注意防潮，保質(zhì)期一年，如發(fā)現(xiàn)紙片變?yōu)榉奂t色即為失敗。
注意事項(xiàng)：
1、檢查食（飲）品時(shí)，凡酸性檢樣應(yīng)以100g/L無菌碳酸鈉溶液調(diào)PH至中性后，方可進(jìn)行稀釋接種。
2、可疑結(jié)果的判斷：大腸菌群菌量的多少與結(jié)果的顯示密切相關(guān)，可出現(xiàn)3種不同現(xiàn)象：（1）菌量較大（≧103cfu/mL），整個(gè)紙片也變黃，但有小而密集的紅色斑點(diǎn)；（2）菌量適中（102-103cfu/mL）,整個(gè)紙片也變黃，但有小而密集的紅色斑點(diǎn)菌量較少（≦102cfu/mL），紙片可呈紫藍(lán)色，并有散在或較密集的紅色斑點(diǎn)，其周圍變黃。因此菌量較大時(shí)，可能出現(xiàn)可疑現(xiàn)象。此時(shí)應(yīng)通過加大樣品稀釋度或進(jìn)一步做復(fù)發(fā)酵進(jìn)行證實(shí)。其它可疑現(xiàn)象也可通過復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn)進(jìn)行確認(rèn)。
3、確認(rèn)試驗(yàn)的方法：進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)，用滅菌鑷子無菌操作將可疑紙片移種到乳糖發(fā)酵管，置37℃24h培養(yǎng)后，對(duì)其產(chǎn)酸產(chǎn)氣者判為大腸菌群陽性，否則判為陰性。
廢物處理：檢測(cè)之后帶菌物品置于121℃下高壓滅菌30分鐘后處理。
執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：Q/HK 0706-2011 廣東環(huán)凱微生物科技有限公司企業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 微生物檢驗(yàn)卡
