產(chǎn)品名稱：阪崎克羅諾桿菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?
英文名稱：PCR Detection Kit for Cronobacter sakazakii (Fluorescent Probe Assays)
產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格：
| 編號(hào) | 規(guī)格 |
| FZ010BF2 | 48 測(cè)試/盒 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：本試劑盒適用于食品中阪崎克羅諾桿菌的檢測(cè)。
檢測(cè)原理：基于 Real Time PCR 技術(shù)，利用針對(duì)于阪崎克羅諾桿菌特異性基因的引物、熒光探針以及其他反應(yīng)所需試劑，加入待檢樣品即可進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。在發(fā)生擴(kuò)增過(guò)程中，熒光探針與目的基因片段結(jié)合，可被 Taq 酶分解并產(chǎn)生熒光信號(hào)，此時(shí)熒光定量 PCR 儀可識(shí)別該熒光信號(hào)，同時(shí)根據(jù)其強(qiáng)弱變化繪制出相應(yīng)的實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線，進(jìn)而判定阪崎克羅諾桿菌是否檢出。
阪崎克羅諾桿菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?產(chǎn)品組分：
儲(chǔ)存條件與保質(zhì)期：-20℃避光儲(chǔ)存，有效期為12個(gè)月，避免反復(fù)凍融。
靈敏度：最低檢驗(yàn)限達(dá)到100 CFU/Test
所需其他材料和適用儀器：熒光定量 PCR 儀（具有能夠檢測(cè) FAM 標(biāo)記的熒光通道）、高速離心機(jī)、移液器、移液槍頭及離心管等。
阪崎克羅諾桿菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?使用指南：
1，樣品前處理
1) 樣品增菌液模板 DNA 的制備：
a) 樣品增菌：參照 GB 4789.40-2016《食品微生物學(xué)檢驗(yàn)克羅諾桿菌屬檢驗(yàn)》，取樣品 100 g（mL），加入到盛有 900 mL 緩沖蛋白胨水（BPW）的無(wú)菌容器中均質(zhì)，36±1℃培養(yǎng) 18-24 h；
b) 吸增菌液1 mL到1.5 mL規(guī)格的無(wú)菌離心管中，6000 r/min 離心 5 min，棄上清，用 50 μL 無(wú)菌超純水懸浮洗滌沉淀 1-2次，6000 r/min 離心 5 min，完全去除上清；
c) 加入 30 μL 裂解液，充分懸浮菌體，輕彈管壁消除氣泡，99℃加熱 10 min；
d) 12000 r/min 離心 15 min，上清即為粗提的 DNA，可轉(zhuǎn)移至 0.2 mL 無(wú)菌離心管中，在-20℃下可長(zhǎng)期保存。
2) 可疑菌落模板 DNA 的制備：挑取可疑菌落，充分懸浮于預(yù)先加有 30 μL 裂解液的無(wú)菌離心管中，后按照上述步驟 c)、d)操作。
2, 加樣、反應(yīng)
1) 按照需求取 n 個(gè) PCR 反應(yīng)管（n=1 管陰性對(duì)照+待檢測(cè)樣品數(shù)+1 管陽(yáng)性對(duì)照），從試劑盒中取出預(yù)混液，充分融化，渦旋后短暫離心，以上每管加入 20 μL 預(yù)混液，待用。
2) 向上述 n 個(gè)反應(yīng)管中分別加入陰性對(duì)照、待測(cè)樣品 DNA、陽(yáng)性對(duì)照各 5 μL，蓋緊管蓋，短暫離心，立即進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增反應(yīng)。
3) PCR 反應(yīng)體系為 25 μL，取 FAM 檢測(cè)通道，在反應(yīng)階段 2 中 60℃時(shí)收集熒光信號(hào)，具體程序如下：
| 反應(yīng)階段 | 溫度 | 時(shí)間 | 信號(hào)收集 | 循環(huán)數(shù) |
| 1 | 95°C | 30 sec | 1 | |
| 2 | 95°C | 5 sec | } 40 | |
| 60°C | 30 sec | ? |
3, 結(jié)果：一般情況下，可通過(guò)軟件自動(dòng)設(shè)定的基線、閾值等直接讀取檢測(cè)結(jié)果。如需調(diào)整，可根據(jù)所使用儀器的自身情況（如噪聲等）以及選取的不同熒光通道進(jìn)行調(diào)整。
1) 質(zhì)量控制：陰性對(duì)照未出現(xiàn)明顯的 S 型擴(kuò)增曲線或Ct 值＞35，陽(yáng)性對(duì)照出現(xiàn) S 型擴(kuò)增曲線且其 Ct 值＜30。若陰陽(yáng)性對(duì)照未能同時(shí)滿足上述條件，則本次檢測(cè)結(jié)果無(wú)效，應(yīng)重新檢測(cè)或與產(chǎn)品技術(shù)支持聯(lián)系。
2) 結(jié)果判讀：（根據(jù)反應(yīng)所得 Ct 值判讀，具體見(jiàn)下表：）
| Ct值 | 結(jié)果判讀 |
| ≤35 | 阪崎克羅諾桿菌陽(yáng)性。 |
| 35~37 | 建議重新檢測(cè)，若結(jié)果 C≥37，則阪崎克羅諾桿菌陰性，反之則為阪崎克羅諾桿菌陽(yáng)性。 |
| ≥37 | 阪崎克羅諾桿菌陰性。 |
更多實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)試劑盒(食源性致病菌檢測(cè)系列) 產(chǎn)品列表：
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 用途 |
| FZ011BF2 | 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? | 用于食品中小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的檢測(cè) |
| FZ012BF2 | 布魯氏菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? | 用于食品中布魯氏菌的檢測(cè) |
| FZ013BF2 | 溶藻弧菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? | 用于食品、水產(chǎn)樣本中溶藻弧菌的檢測(cè) |
| FZ014BF2 | 創(chuàng)傷弧菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? | 用于食品中創(chuàng)傷弧菌的檢測(cè) |
| FZ015BF2 | 嗜肺軍團(tuán)菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? | 用于飲用水、非飲用水、公共場(chǎng)所環(huán)境樣本中嗜肺軍團(tuán)菌的檢測(cè) |
| FZ016BF2 | 唐菖蒲伯克霍爾德氏菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? | 于食品中唐菖蒲伯克霍爾德氏菌的定性檢測(cè) |
| FZ017BF2 | 大腸埃希氏菌志賀毒素核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? | 用于食品中致病性大腸埃希氏菌（STEC）產(chǎn)志賀毒素類型的定性檢測(cè) |
| FZ001BF2 | 銅綠假單胞菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? | 包裝飲用水等水體中銅綠假單胞菌的定性檢測(cè) |
| FZ002BF2 | 糞鏈球菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? | 包裝飲用水等水體中糞鏈球菌(EF)的定性檢測(cè) |
| FZ003BF2 | 產(chǎn)氣莢膜梭菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? | 用于食品和水體中產(chǎn)氣莢膜梭菌的定性檢測(cè) |
| FZ004BF2 | 金黃色葡萄球菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? | 用于食品樣本或可疑菌落中金黃色葡萄球菌的檢測(cè) |
| FZ005BF2 | 沙門氏菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? | 用于食品中沙門氏菌的檢測(cè) |
| FZ006BF2 | 志賀氏菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? | 用于食品中志賀氏菌的定性檢測(cè) |
| FZ007BF2 | 單增李斯特氏菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? | 用于食品中單增李斯特氏菌的檢測(cè) |
| FZ008BF2 | 副溶血性弧菌核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? | 用于食品中副溶血性弧菌的定性檢測(cè) |
| FZ009BF2 | 大腸埃希氏菌O157:H7核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? | 用于食品中大腸埃希氏菌O157:H7 的檢測(cè) |
