奶粉中的克羅諾桿菌如何檢測(cè)？
發(fā)布時(shí)間：2024-10-23 瀏覽次數(shù)：328
克羅諾桿菌是機(jī)會(huì)食源性病原體，通常在受污染的嬰兒配方奶粉（PIF）中檢測(cè)到。因此，需要對(duì)克羅諾桿菌進(jìn)行快速檢測(cè)和控制，以防止疫情爆發(fā)，所以就需要開(kāi)發(fā)特定的適配體。
韓國(guó)科學(xué)技術(shù)研究院的Hye Ri Kim等研究人員使用一種新提出的順序分配方法分離出了對(duì)克羅諾桿菌七個(gè)種（C. sakazakii, C. malonaticus, C. turicensis, C. muytjensii, C. dublinensis, C. condimenti, and C. universalis)都特異性的適體。與通過(guò)指數(shù)富集（SELEX）過(guò)程進(jìn)行配體的傳統(tǒng)系統(tǒng)進(jìn)化相比，該方法避免了重復(fù)的富集步驟，減少了總適體選擇時(shí)間。共分離出四種適體，對(duì)克羅諾桿菌七個(gè)種都顯示出高親和力和特異性，解離常數(shù)為3.7–86.6 nM。這代表了首次使用順序分割方法成功分離出多個(gè)靶標(biāo)的適體。此外，所選擇的適體可以有效地檢測(cè)受污染PIF中的克羅諾桿菌屬。
研究人員使用受污染的PIF進(jìn)行適體檢測(cè)測(cè)試，以確認(rèn)適體可用于克羅諾桿菌的檢測(cè)，該測(cè)試改編自韓國(guó)食品和藥物安全部提出的基于培養(yǎng)的方法：
根據(jù)熒光強(qiáng)度，藍(lán)綠色菌落（代表克羅諾桿菌屬）僅在含有克羅諾桿菌的混合物中檢測(cè)到，而在使用所選適體僅含有非目標(biāo)細(xì)菌的混合物中未檢測(cè)到。這一發(fā)現(xiàn)表明，所選擇的適體可以有效地檢測(cè)克羅諾桿菌。在第二次富集培養(yǎng)液中，減少了總分析時(shí)間：
基于培養(yǎng)的方法使用多種選擇性培養(yǎng)基來(lái)富集目標(biāo)細(xì)菌。也就是說(shuō)，順序富集培養(yǎng)在所需時(shí)間和二次污染方面存在缺點(diǎn)。相比之下，基于適體的方法可以直接檢測(cè)目標(biāo)細(xì)菌。本研究表明，與基于培養(yǎng)的方法相比，基于適配體的方法顯著縮短了總分析時(shí)間。因此，所選擇的適體可以同時(shí)檢測(cè)多目標(biāo)細(xì)菌。因此，可以提出這種新的細(xì)菌檢測(cè)方法來(lái)繞過(guò)基于培養(yǎng)的方法的缺點(diǎn)。
參考文獻(xiàn)：Hye Ri Kim, Byoung Chan Kim.Development of multi-reactive aptamers for Cronobacter spp. using the sequential partitioning method to detect them in powdered infant formula. Analytica Chimica Acta. 2023. 1249: 340935.
DOI: doi.org/10.1016/j.aca.2023.340935
來(lái)源：微生物安全與健康網(wǎng)，作者~李琦。
