奶粉中的克羅諾桿菌如何檢測？
發(fā)布時間：2024-10-23 瀏覽次數(shù)：248
克羅諾桿菌是機(jī)會食源性病原體，通常在受污染的嬰兒配方奶粉（PIF）中檢測到。因此，需要對克羅諾桿菌進(jìn)行快速檢測和控制，以防止疫情爆發(fā)，所以就需要開發(fā)特定的適配體。
韓國科學(xué)技術(shù)研究院的Hye Ri Kim等研究人員使用一種新提出的順序分配方法分離出了對克羅諾桿菌七個種（C. sakazakii, C. malonaticus, C. turicensis, C. muytjensii, C. dublinensis, C. condimenti, and C. universalis)都特異性的適體。與通過指數(shù)富集（SELEX）過程進(jìn)行配體的傳統(tǒng)系統(tǒng)進(jìn)化相比，該方法避免了重復(fù)的富集步驟，減少了總適體選擇時間。共分離出四種適體，對克羅諾桿菌七個種都顯示出高親和力和特異性，解離常數(shù)為3.7–86.6 nM。這代表了首次使用順序分割方法成功分離出多個靶標(biāo)的適體。此外，所選擇的適體可以有效地檢測受污染PIF中的克羅諾桿菌屬。
研究人員使用受污染的PIF進(jìn)行適體檢測測試，以確認(rèn)適體可用于克羅諾桿菌的檢測，該測試改編自韓國食品和藥物安全部提出的基于培養(yǎng)的方法：
根據(jù)熒光強(qiáng)度，藍(lán)綠色菌落（代表克羅諾桿菌屬）僅在含有克羅諾桿菌的混合物中檢測到，而在使用所選適體僅含有非目標(biāo)細(xì)菌的混合物中未檢測到。這一發(fā)現(xiàn)表明，所選擇的適體可以有效地檢測克羅諾桿菌。在第二次富集培養(yǎng)液中，減少了總分析時間：
基于培養(yǎng)的方法使用多種選擇性培養(yǎng)基來富集目標(biāo)細(xì)菌。也就是說，順序富集培養(yǎng)在所需時間和二次污染方面存在缺點(diǎn)。相比之下，基于適體的方法可以直接檢測目標(biāo)細(xì)菌。本研究表明，與基于培養(yǎng)的方法相比，基于適配體的方法顯著縮短了總分析時間。因此，所選擇的適體可以同時檢測多目標(biāo)細(xì)菌。因此，可以提出這種新的細(xì)菌檢測方法來繞過基于培養(yǎng)的方法的缺點(diǎn)。
參考文獻(xiàn)：Hye Ri Kim, Byoung Chan Kim.Development of multi-reactive aptamers for Cronobacter spp. using the sequential partitioning method to detect them in powdered infant formula. Analytica Chimica Acta. 2023. 1249: 340935.
DOI: doi.org/10.1016/j.aca.2023.340935
來源：微生物安全與健康網(wǎng)，作者~李琦。
