国产精品亚洲综合专区片高清,一区二区国产高清视频在线,中国小呦呦呦呦呦精品,av无码国产麻豆映画传媒

English

超高特異性E. coli O157:H7活性菌株便攜式生物發(fā)光檢測(cè)

發(fā)布時(shí)間:2024-08-23    瀏覽次數(shù):211

摘要:活的食源性致病菌繁殖迅速,對(duì)人體健康危害巨大,需要適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行監(jiān)管。本研究開(kāi)發(fā)了一種便攜式三磷酸腺苷(ATP)生物發(fā)光傳感器,該傳感器對(duì)大腸桿菌O157:H7菌株具有高特異性,可通過(guò)定向噬菌體修飾的攪拌棒提取和生物增殖協(xié)同增強(qiáng)。簡(jiǎn)單地說(shuō),選擇的噬菌體定向固定在聚二烯基二甲基氯化銨修飾的金攪拌棒上作為生物受體。經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單的攪拌棒吸收萃取和在LB培養(yǎng)基中的生物增殖,捕獲的大腸桿菌O157: H7的數(shù)量激增。最后用便攜式ATP生物發(fā)光傳感器對(duì)其進(jìn)行定量。該傳感器利用噬菌體的高特異性和簡(jiǎn)單的信號(hào)雙擴(kuò)增策略,在菌株水平上實(shí)現(xiàn)了對(duì)活菌的識(shí)別,具有較高的靈敏度。此外,便攜式信號(hào)讀出器使其適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。在最佳條件下,該方法的檢測(cè)范圍為102 ~ 107 CFU mL-1,30 min內(nèi)的最低檢出限為30 CFU mL-1。對(duì)實(shí)際樣品的檢測(cè)結(jié)果表明,該方法與平板計(jì)數(shù)法無(wú)差異,但檢測(cè)時(shí)間大大縮短。此外,該方法為活體大腸桿菌的即時(shí)檢測(cè)(POCT)提供了新的途徑,有望推廣到其他具有相應(yīng)噬菌體的毒力菌株的檢測(cè)中。

本研究設(shè)計(jì)了一種便攜式ATP生物發(fā)光傳感器,該傳感器與定向噬菌體修飾的攪拌棒提取和生物增殖相結(jié)合,可用于大腸桿菌O157:H7活毒株的快速現(xiàn)場(chǎng)鑒定。圖1闡述了噬菌體固定化攪拌棒的制備過(guò)程和ATP生物發(fā)光檢測(cè)。首先,用聚二烯丙基二甲氯化銨(PDDA)對(duì)攪拌棒進(jìn)行帶正電荷的改性。然后利用靜電吸引將帶負(fù)電荷的噬菌體頭部固定,使噬菌體的尾纖維面向溶液。這樣,噬菌體在攪拌棒上的定向固定化實(shí)現(xiàn)了特異性和高效捕獲目標(biāo)菌株。通過(guò)經(jīng)典的SBSE過(guò)程后,將捕獲的大腸桿菌O157:H7攪拌棒置于Luria-Bertani (LB)培養(yǎng)基中進(jìn)行生物增殖,進(jìn)一步提高細(xì)菌濃度。最后,利用便攜式ATP生物發(fā)光傳感器檢測(cè)大腸桿菌O157:H7活性濃度。通過(guò)對(duì)噬菌體的研究表明,本工作中的噬菌體對(duì)目標(biāo)大腸桿菌O157:H7表現(xiàn)出超高的菌株選擇性(圖2),并且通過(guò)定向修飾后,能夠進(jìn)一步增強(qiáng)噬菌體對(duì)目標(biāo)菌的抓捕能力(圖3)。該方法具有噬菌體的高特異性識(shí)別、簡(jiǎn)單的雙擴(kuò)增策略和便攜式ATP生物發(fā)光傳感器等優(yōu)點(diǎn),可在現(xiàn)場(chǎng)操作簡(jiǎn)單,定量測(cè)定靶菌的微量含量。

圖1. (A)噬菌體定向固定在攪拌棒上的制備工藝。(B)雙放大策略示意圖。(C)使用便攜式ATP生物發(fā)光傳感器對(duì)活大腸桿菌O157:H7菌株進(jìn)行定量檢測(cè)。

圖2.噬菌體對(duì)不同細(xì)菌及不同大腸桿菌菌株識(shí)別能力

圖3.定向修飾的噬菌體對(duì)細(xì)菌的抓捕能力

圖4. 現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)流程

總結(jié):在這項(xiàng)工作中,利用便攜式生物發(fā)光傳感器開(kāi)發(fā)了一種快速、特異性和現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)大腸桿菌O157:H7菌株的方法。它在菌株水平上實(shí)現(xiàn)了對(duì)細(xì)菌的識(shí)別。以噬菌體攪拌棒為基礎(chǔ),建立了一種高效的SBSE預(yù)處理方法,只需5 min即可富集大腸桿菌,實(shí)現(xiàn)了食品樣品中O157:H7大腸桿菌的快速特異性分離。此外,攪拌棒上捕獲的細(xì)菌經(jīng)LB增殖后利用便攜式ATP生物發(fā)光傳感器對(duì)活菌進(jìn)行定量檢測(cè)。檢測(cè)信號(hào)可放大36倍,LOD為30 CFU mL-1。結(jié)果表明,該方法可用于大腸桿菌O157:H7活株的定量檢測(cè)。

參考文獻(xiàn):Cao C, Wang M, Zhang D, et al. Portable ATP bioluminescence sensor with high specificity for live Escherichia coli O157: H7 strain synergistically enhanced by orientated phage-modified stir bar extraction and bio-proliferation[J]. Biosensors and Bioelectronics, 2023, 220: 114852.

來(lái)源:微生物安全與健康網(wǎng)
鏈接:https://www.mbiosh.com/column/testing-technology/testing-technology-method/5638

交换朋友的妻子中文字幕-日本美女8x8x8x8| 乱入一二三免费在线观看-久久精品亚洲精品国产色婷婷| 午夜精品午夜福利在线-内射无套内射国产精品视频| 99精品只有久久精品免费-蜜臀一区二区三区精品久久久| 美女把腿张开给帅哥桶-无码无套少妇18p在线直播| 国产日韩电影一区二区三区-美女露双奶头无遮挡物| 九九热这里只有精品九九-欧美日韩人妻精品一二三| 国产精品熟女视频一区二区-国产日韩精品欧美一区喷水| 九九热这里只有精品九九-欧美日韩人妻精品一二三| av一区免费在线观看-中文字幕日韩国产精品视频| 日本女优一卡二卡在线观看-欧美大胆a级视频秒播| 国产综合日韩激情在线-日韩精品人妻一专区二区三区| 国产精品v欧美精品v日韩精品-国产欧美日韩精品区一区二污污污| 99在线免费观看视频-丰满人妻一区二区三区视频53| 性色国产成人久久久精品二区三区-偷窥中国美女洗澡视频| 丝袜美腿人妻连续中出-在线观看日韩三级视频| 久久久噜噜噜久久狠狠50岁-精品一区二区三区av| sobo欧美在线视频-免费av网址一区二区| 国产午夜精品理论片A级漫画-久久精品国产99亚洲精品| 欧美亚洲另类久久久精品-国产精品一区二区亚洲推荐| 久久99国产综合精品女人-日韩一区二区三区在线不卡| 天天干天天日天天射天天舔-精品香蕉视频官网在线观看| 中文字幕日本在线资源-国产+成+人+亚洲欧洲自线| 国产美女网站在线观看-国产精品亚洲综合网69| 亚洲欧美精品在线一区-99热国产在线手机精品99| 国产欧美日本不卡精美视频-日本后入视频在线观看| 天天日天天干天天综合-99久久综合狠狠综合久久| 白嫩美女娇喘呻吟高潮-久久一区二区三区日产精品| 国产欧美日本一区二区-一区二区三区亚洲在线播放| 国产av剧情护士麻豆-三级国产精品欧美在线观看| 97一区二区三区在线-欧美护士性极品hd4k| 久久免费观看归女高潮特黄-黄色av一本二本在线观看| 日韩毛片在线免费人视频-超碰中文字幕av在线| 欧美一级二级三级在线看-日韩精品欧美嫩草久久99| 亚洲欧美日韩国产一区二区三区-国产欧美日韩一区二区免费| 99热在线精品免费6-av一区二区在线观看| 国产欧美一区二区三区嗯嗯-欧美一区二区日本国产激情| 国产成人精品亚洲精品密奴-国产成人AV无码精品| 婷婷综合在线视频观看-亚洲一区二区三区香蕉| 91亚洲美女视频在线-熟妇人妻精品一区二区三区蜜臀| sobo欧美在线视频-免费av网址一区二区|