培養(yǎng)基的分裝與儲(chǔ)存
發(fā)布時(shí)間：2024-05-22 瀏覽次數(shù)：2301
培養(yǎng)基的分裝
培養(yǎng)基的分裝應(yīng)根據(jù)使用的目的和要求分裝于不同的容器中，有的分裝后滅菌，有的則滅菌后再無菌操作分裝，但分裝量最大不宜超過容器容量的1/2，以免高壓滅菌時(shí)溢出或不能充分混勻。
1. 增菌培養(yǎng)基：分裝量約為容器容量的1/3~1/2，濃縮的培養(yǎng)基還可根據(jù)濃縮倍數(shù)減少分裝量。
2. 生化試驗(yàn)培養(yǎng)基：一般使用10 x100mm試管每管分裝2~3mL。
3. 半固體培養(yǎng)基：分裝量約為試管長(zhǎng)度的1/3~1/2，滅菌后直立凝固備用。
4. 瓊脂斜面：分裝量約為試管容量的1/5，滅菌后趁熱放成斜面使之凝固，斜面長(zhǎng)度約為試管長(zhǎng)度的 2/3。
5. 瓊脂平板：將滅菌或加熱熔化的培養(yǎng)基冷至50℃左右，以無菌手續(xù)傾人滅菌平皿內(nèi)，內(nèi)徑9cm的平皿一般需傾注13~15mL(MH瓊脂應(yīng)25mL)。注意傾注培養(yǎng)基時(shí)平皿要放平，以保證培養(yǎng)基均勻平鋪于皿底，并勿將皿蓋全啟開，以免空氣中細(xì)菌及塵埃落入。新制備的平板培養(yǎng)基凝固后表面會(huì)形成一定量的凝集水，影響細(xì)菌的分離效果，通常可將平皿倒扣于37℃培養(yǎng)箱內(nèi)約30min，待培養(yǎng)基表面無水滴后使用。
分裝培養(yǎng)基時(shí)還應(yīng)注意以下兩點(diǎn)：
(1) 各種分裝容器應(yīng)清潔干凈，最好經(jīng)干烤滅菌后使用，以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。
(2) 每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝2支，每支10mL，隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌，以備測(cè)定該批培養(yǎng)基的最后pH之用。
培養(yǎng)基的儲(chǔ)存
制成的培養(yǎng)基，不宜保存過久，最好現(xiàn)用現(xiàn)配。確需儲(chǔ)存一定時(shí)間的培養(yǎng)基，每批應(yīng)注明日期，嚴(yán)格密封置于2℃~8℃冰箱保存。試管培養(yǎng)基一般可保存3~6個(gè)月，平板培養(yǎng)基密封于塑料袋內(nèi)可保存2~4周。我們將巧克力色血瓊脂，用一次性塑料平皿，密封儲(chǔ)存于2℃~8℃冰箱，1月內(nèi)無明顯變化，接種腦膜炎奈瑟菌仍生長(zhǎng)良好。培養(yǎng)基的避光保存尤為重要，據(jù)報(bào)導(dǎo)，培養(yǎng)基日光直射15min，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌特性的改變。培養(yǎng)基不宜多次反復(fù)加熱。有的培養(yǎng)基不宜在冰箱保存，如用于無菌試驗(yàn)的流體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基，因含有少量瓊脂，在低溫下易凝固，影響需氧菌生長(zhǎng)，若反復(fù)加熱，可能會(huì)產(chǎn)生絮狀物，影響結(jié)果的觀察。此培養(yǎng)基應(yīng)放30℃以下的室溫避光保存，盡早使用。
干燥培養(yǎng)基在冷、暗、干燥處密封保存，保質(zhì)期可達(dá)2~3年。其保質(zhì)期長(zhǎng)短與培養(yǎng)基成分及其生產(chǎn)、儲(chǔ)存環(huán)境、密封程度密切相關(guān)。
不同的培養(yǎng)基保存時(shí)間存在差異，無論何種培養(yǎng)基，關(guān)鍵是保存條件和培養(yǎng)基質(zhì)量變化，只要發(fā)生濃縮、干裂、顏色變化、有菌生長(zhǎng)或干粉培養(yǎng)基潮解，就應(yīng)廢棄不用。反之，經(jīng)測(cè)試質(zhì)量無變化時(shí)，仍可使用。
來源：《微生物培養(yǎng)基實(shí)用手冊(cè)》電子書
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