培養(yǎng)基是微生物檢驗(yàn)中常用的一種實(shí)驗(yàn)室試劑，主要用于提供微生物生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)、能量、生長(zhǎng)因子等物質(zhì)和適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。常見(jiàn)的培養(yǎng)基種類很多，根據(jù)不同的需求可以選擇不同類型的培養(yǎng)基。

具體來(lái)說(shuō)，培養(yǎng)基在微生物檢驗(yàn)中的作用包括：
   1. 提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：培養(yǎng)基中含有細(xì)菌或真菌所需的碳源、氮源、磷源、微量元素、維生素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，能夠滿足微生物的生長(zhǎng)和繁殖需要。
   2. 提供生長(zhǎng)因子：某些微生物需要特殊的生長(zhǎng)因子才能生長(zhǎng)，如某些細(xì)菌需要血紅蛋白、NAD等，培養(yǎng)基可以添加這些生長(zhǎng)因子以促進(jìn)微生物的生長(zhǎng)。
   3. 維持適宜的生理狀態(tài)：培養(yǎng)基可以調(diào)節(jié)pH值、溫度、氧氣濃度、鹽度等因素，使微生物處于適宜的生理狀態(tài)，促進(jìn)其生長(zhǎng)和繁殖。
   4. 檢測(cè)微生物數(shù)量：通過(guò)培養(yǎng)基上的特定反應(yīng)，如酶底物法、品紅亞硫酸鈉法等，可以檢測(cè)微生物的數(shù)量和質(zhì)量。

總之，培養(yǎng)基是微生物檢驗(yàn)中必不可少的一種實(shí)驗(yàn)室試劑，能夠提供微生物所需的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境，促進(jìn)其生長(zhǎng)和繁殖，從而為微生物檢驗(yàn)提供了必要的條件。在新版的 GBT 5750.12-2023《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 第12部分：微生物指標(biāo)》中提供了三種總大腸菌群的檢驗(yàn)方法，其培養(yǎng)基的成分作用如下：

一、多管發(fā)酵法

1.1 乳糖蛋白胨培養(yǎng)液成分及其作用如下：
   a) 蛋白胨：提供細(xì)菌所需的氮源和碳源，促進(jìn)細(xì)菌的生長(zhǎng)。
   b) 牛肉膏：提供多種氨基酸和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)細(xì)菌的生長(zhǎng)。
   c) 乳糖：為大腸桿菌等腸道細(xì)菌提供碳源，促進(jìn)它們的代謝。
   d) 氯化鈉：調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓，保證培養(yǎng)基中的離子平衡。
   e) 溴甲酚紫乙醇溶液(16 g/L)：是一種指示劑，將在發(fā)酵過(guò)程中變色，用于判斷菌落形成和數(shù)量。
   f) 純水：作為培養(yǎng)基的溶劑，保證培養(yǎng)基的均勻性和穩(wěn)定性。

這些成分共同作用，能夠提供合適的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件，促進(jìn)水中總大腸菌群的生長(zhǎng)和繁殖，并且通過(guò)溴甲酚紫乙醇溶液的變色反應(yīng)，可以判斷菌落形成和數(shù)量。

1.2 伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基各成分的作用如下：
   a) 蛋白胨：為細(xì)菌提供氮源和碳源，促進(jìn)細(xì)菌的生長(zhǎng)。
   b) 乳糖：為大腸桿菌等腸道細(xì)菌提供碳源，促進(jìn)它們的代謝。
   c) 磷酸氫二鉀：調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值，使其維持在適宜的范圍內(nèi)。
   d) 瓊脂：作為凝膠劑，使得培養(yǎng)基能夠固化。
   e) 純水：作為培養(yǎng)基的溶劑，保證培養(yǎng)基的均勻性和穩(wěn)定性。
   f) 伊紅水溶液(20.0 g/L)：是一種指示劑，將在發(fā)酵過(guò)程中變色，用于判斷菌落形成和數(shù)量。
   g) 美藍(lán)水溶液(5.0 g/L)：也是一種指示劑，將在發(fā)酵過(guò)程中變色，用于判斷菌落形成和數(shù)量。

這些成分共同作用，能夠提供合適的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件，促進(jìn)水中總大腸菌群的生長(zhǎng)和繁殖，并且通過(guò)伊紅美藍(lán)指示劑的變色反應(yīng)，可以判斷菌落形成和數(shù)量。

二、濾膜法

2.1 品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基各成分的作用如下：
   a) 蛋白胨：為細(xì)菌提供氮源和碳源，促進(jìn)細(xì)菌的生長(zhǎng)。
   b) 酵母浸膏：提供多種維生素和微量元素，促進(jìn)細(xì)菌的生長(zhǎng)。
   c) 牛肉膏：為細(xì)菌提供營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)因子，促進(jìn)細(xì)菌的生長(zhǎng)。
   d) 乳糖：為細(xì)菌提供碳源和能量，促進(jìn)細(xì)菌的生長(zhǎng)。
   e) 瓊脂：作為培養(yǎng)基的凝膠劑，使培養(yǎng)基凝固。
   f) 磷酸氫二鉀：調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值，使其維持在適宜的范圍內(nèi)。
   g) 無(wú)水亞硫酸鈉：具有抗氧化作用，保護(hù)培養(yǎng)基中的細(xì)菌不被氧化破壞。
   h) 堿性品紅乙醇 [φ (C₂H₅OH)=95 %]溶液（50.0 g/L）：是一種指示劑，能夠區(qū)分產(chǎn)酸和產(chǎn)氣的細(xì)菌，使其呈現(xiàn)紅色或粉紅色。
   i) 純水：作為培養(yǎng)基的溶劑，保證培養(yǎng)基的均勻性和穩(wěn)定性。

這些成分共同作用，能夠提供合適的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件，促進(jìn)水中總大腸菌群的生長(zhǎng)和繁殖。通過(guò)品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基的特殊配方，能夠區(qū)分產(chǎn)酸和產(chǎn)氣的細(xì)菌，并且使其呈現(xiàn)紅色或粉紅色，從而進(jìn)行總大腸菌群的檢測(cè)。

三、酶底物法

3.1、MMO-MUG培養(yǎng)基各成分的作用如下：
   a) 硫酸銨：提供氮源，促進(jìn)細(xì)菌的生長(zhǎng)。
   b) 無(wú)水硫酸錳：作為酶的輔因子，促進(jìn)酶在催化反應(yīng)過(guò)程中的活性。
   c) 無(wú)水硫酸鋅：作為酶的輔因子，促進(jìn)酶在催化反應(yīng)過(guò)程中的活性。
   d) 無(wú)水硫酸鎂：提供鎂離子，促進(jìn)酶的活性。
   e) 氯化鈉：調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓，保證細(xì)胞內(nèi)外的離子平衡。
   f) 氯化鈣：提供鈣離子，促進(jìn)細(xì)菌的生長(zhǎng)。
   g) 亞硫酸鈉：具有抗氧化作用，保護(hù)培養(yǎng)基中的酶不被氧化破壞。
   h) 兩性霉素 B（Amphotericin B）：是一種抗真菌藥物，用于防止培養(yǎng)基中的真菌污染。
   i) 鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷（ONPG）：是一種酶底物，在酶的作用下會(huì)被分解，產(chǎn)生黃色產(chǎn)物，用于檢測(cè)細(xì)菌的數(shù)量。
   j) 4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷（MUG）：也是一種酶底物，在酶的作用下會(huì)被分解，產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，用于檢測(cè)細(xì)菌的數(shù)量。
   k) 茄屬植物萃取物（Solanium 萃取物）：為細(xì)菌提供營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)因子，促進(jìn)細(xì)菌的生長(zhǎng)。
   l) N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙磺酸鈉鹽（HEPES 鈉鹽）：調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值，使其維持在適宜的范圍內(nèi)。
   m) N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙磺酸（HEPES）：同樣用于調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值。
   n) 純水：作為培養(yǎng)基的溶劑，保證培養(yǎng)基的均勻性和穩(wěn)定性。

這些成分共同作用，能夠提供合適的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件，促進(jìn)水中總大腸菌群的生長(zhǎng)和繁殖，并且通過(guò)ONPG和MUG酶底物的分解反應(yīng)，能夠產(chǎn)生黃色或藍(lán)色產(chǎn)物，用于檢測(cè)細(xì)菌的數(shù)量。

原標(biāo)題：“方法解讀1：水中總大腸菌群檢驗(yàn)方法中的培養(yǎng)基”

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