微生物檢測凍干質控菌種單核細胞增生李斯特菌 ATCC19115使用說明
1、 復蘇單核細胞增生李斯特菌標準菌株前應準備適于該菌種生長的培養(yǎng)基和培養(yǎng)設備，所有操作均應在符合生物安全保護及無菌條件下進行。
2、 啟開單核細胞增生李斯特菌標準菌株前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面。在無菌條件下，按鋁蓋上的箭頭方向打開塑蓋，撕開鋁蓋，打開西林瓶膠塞，加入復蘇液（購買菌株包裝中提供），將單核細胞增生李斯特菌標準菌株（干粉）制成懸浮液，然后用無菌滴管或移液器吸取適量，移至非選擇性固體培養(yǎng)基平板（或液體培養(yǎng)基）上（除特殊情況或特別推薦外），按推薦的培養(yǎng)條件進行培養(yǎng)和傳代保存（詳見附表“凍干菌種的復蘇培養(yǎng)和傳代保存”）。
3、 有個別凍干菌種（如弧菌屬、乳桿菌屬等）復蘇速度較慢，可按2操作后，同時將菌懸液置推薦的培養(yǎng)條件培養(yǎng)過夜，再選用適合單核細胞增生李斯特菌生長的選擇性培養(yǎng)基進行分離，操作見4。
4 、培養(yǎng)后觀察菌種的生長情況，并檢查其純度，如發(fā)現純度不能滿足要求時，應選用適合單核細胞增生李斯特菌生長的選擇性培養(yǎng)基進行分離，并按推薦的培養(yǎng)條件進行培養(yǎng)，培養(yǎng)后觀察目標菌的菌落特征與生化特征，挑取典型菌落做純培養(yǎng)后再使用。
5、 本品為一次性用品，開啟之后不宜反復使用或保存，暫不使用時，建議4℃保藏。
6、 復蘇后的菌種一般宜傳代（如:斜面?zhèn)鞔?～3次后使用，菌種傳代5次后建議棄置。
7 、單核細胞增生李斯特菌標準菌株購買后應在保質期內使用。
注）：購買后如發(fā)現菌種異常或污染等情況，請在購買之日起1個月內與我們聯(lián)系。
凍干菌種單核細胞增生李斯特菌標準菌株復蘇示意圖：
附表 凍干質控標準菌株的復蘇培養(yǎng)和傳代保存
稱 | 復蘇液 （包裝中提供） | 復蘇培養(yǎng)基 | 培養(yǎng)條件 | 保存溫度 | 轉接 頻率 | 備注 |
大腸埃希氏菌、沙門氏菌、志賀氏菌 | 腦心浸液培養(yǎng)基 | 營養(yǎng)瓊脂（022020） | 24h～48h | 2~ | 一個月 |
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阪崎腸桿菌、陰溝腸桿菌、產氣腸桿菌 | ||||||
肺炎克雷伯氏菌、粘質沙雷伯氏菌 | ||||||
變形桿菌、弗氏檸檬酸桿菌 | ||||||
小腸結腸炎耶爾森氏菌 | ||||||
葡萄球菌、微球菌、馬紅球菌、芽胞桿菌 | ||||||
假單胞菌、氣單胞菌屬 | 腦心浸液培養(yǎng)基 | 營養(yǎng)瓊脂（022020） | 24h～48h | 一個月 |
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熒光假單胞菌 | 腦心浸液培養(yǎng)基 | 營養(yǎng)瓊脂（022020） | 25℃-30℃ 24h～48h | 一個月 |
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腸球菌、鏈球菌 | 腦心浸液培養(yǎng)基 | 血平板（024070） | 24h～48h | 2~ | 半個月 |
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李斯特氏菌 | 腦心浸液培養(yǎng)基 | 胰蛋白胨大豆酵母浸膏瓊脂 (TSA-YE) (026020) | 24h～48h | 2~ | 一個月 |
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梭菌 | 腦心浸液培養(yǎng)基 | 皰肉牛肉粒肉湯（027140）或梭菌増菌肉湯（027145）或哥倫比亞血平板（CP0160） | 48h～72h厭氧培養(yǎng) | 2~8℃ 厭氧環(huán)境 | 半個月 | 接種皰肉牛肉粒肉湯后加無菌液體石蠟（029110）高約1cm。 |
霍亂弧菌、擬態(tài)弧菌 | 堿性蛋白胨水 | 堿性瓊脂（025040） | 24h～48h | 一個月 |
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其它弧菌(副溶血性弧菌、創(chuàng)傷弧菌、河流弧菌、溶藻弧菌等) | 3％NaCl堿性蛋白胨水 | 3％NaCl 營養(yǎng)瓊脂 或3％NaCl TSA （025043） | 24h～48h | 一個月 |
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霉菌、念珠菌、酵母菌 | 沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基 | 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA)(021050) | 2d～5d | 2~ | 兩個月 |
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空腸彎曲菌 | 布氏肉湯 | 血平板（024070） 42± | 42± | 2~ 微需氧 | 一周 |
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雙歧桿菌 | TPY肉湯 | 雙歧桿菌瓊脂（027330） | 48h～72h厭氧培養(yǎng) | 2~ 厭氧環(huán)境 | 一周 |
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其它乳酸菌(乳酸桿菌、乳酸桿菌亞種、嗜熱乳酸鏈球菌) | MRS肉湯或脫脂乳溶液 | 滅菌脫脂乳或 MRS瓊脂（027315） | 24h～48h | 2~ | 一周 |
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嗜血桿菌屬、奈瑟氏菌屬 | 腦心浸液培養(yǎng)基 | 巧克力平板培養(yǎng)基 (普通)(029032) | 48h～72h 5～10%CO2環(huán)境 | 2~ 5~10%CO2 環(huán)境 | 一周 |
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軍團菌 | 腦心浸液培養(yǎng)基 | BCYE平板 (CP0020) | 4d～7d | 2~ | 一個月 | 轉接時用一次性接種環(huán)，不能使用酒精燈；如使用平板轉接，培養(yǎng)時建議用牛皮紙或報紙包好，避免平板失水變干。 |
