大腸埃希氏菌O157：H7/NM生化鑒定盒(GB/T 4789.36-2008, 13種×10次)
一)整套試劑及用品
鑒定生化反應(yīng)的13種試劑(表1)、10瓶0.85%無(wú)菌生理鹽水、1瓶0.5 McFarland的濁度管、10支一次性吸管。
二)西林瓶的使用方法
開(kāi)啟西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面，在無(wú)菌條件下，按鋁蓋上的箭頭方向打開(kāi)鋁蓋，撕開(kāi)鋁蓋，打開(kāi)西林瓶膠塞(如圖1)。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
三)大腸埃希氏菌O157：H7生化鑒定盒的詳細(xì)使用方法
大腸桿菌O157：H7為革蘭氏陰性桿菌，需氧或兼性，有周鞭毛，并有菌毛，不產(chǎn)生芽孢的桿菌。發(fā)酵乳糖，不發(fā)酵或遲緩發(fā)酵山梨醇；氧化酶陰性；MUG陰性。
從分離培養(yǎng)平板上挑取可疑菌苔接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上分純，于35－37℃培養(yǎng)18-24h，挑取菌落置于已配備的無(wú)菌生理鹽水中，與0.5 McFarland的濁度管比濁，將菌懸液制備成0.5McFarland ( 約108cfu/mL )，用吸管吸取2滴（約0.06mL）菌懸液加入每種微量生化管內(nèi)。將已接種的 西林瓶再套上膠塞，一般采用全加塞（如圖2左兩瓶所示），特殊情況在下表注明采用半加塞（如圖2右兩瓶所示），直立于內(nèi)托的凹槽內(nèi)（如圖2），或放置于合適的瓶架中，于35－37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，結(jié)果觀察見(jiàn)表1。
注意：如有特殊的接種方式、培養(yǎng)時(shí)間或培養(yǎng)方式，請(qǐng)?jiān)斠?jiàn)每種生化鑒定管附帶的使用說(shuō)明。
備注：本鑒定盒是按照環(huán)凱產(chǎn)品目錄中的品種成份從左到右的順序擺放。
四)出血性大腸桿菌O157：H7的生化鑒定程序(見(jiàn)下圖)和生化鑒定特征(見(jiàn)表2)
出血性大腸桿菌O157：H7生化鑒定程序圖：
在營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上挑取分純的菌落，用 O157：H7標(biāo)準(zhǔn)血清或 O157乳膠凝集試劑測(cè)試，對(duì)于H7因子血清不凝集者，應(yīng)穿刺 接種半固體瓊脂，檢查動(dòng)力，經(jīng)連續(xù)傳代3次，動(dòng)力試驗(yàn)陰性，H7因子血清凝集陰性者，確定為無(wú)動(dòng)力株。
