071820 單核增生性李斯特氏菌生化鑒定盒（10種×10支）
一）整套試劑及用品
鑒定生化反應(yīng)的10種試劑（表1）、10瓶0.85%無菌生理鹽水、1瓶1 McFarland的濁度管、10支一次性吸管。
二）生化管的使用方法
開啟西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面，在無菌條件下，按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋，撕開鋁蓋，打開西林瓶膠塞（如圖1）。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
三）單核增生李斯特氏菌生化鑒定盒的詳細使用方法
挑取選擇性培養(yǎng)基上的可疑菌落接種木糖、鼠李糖發(fā)酵管36±
純培養(yǎng)物供染色鏡檢和生化試驗.
染色鏡檢:將上述純培養(yǎng)物做革蘭氏染色并做濕片檢查;李斯特氏菌為革蘭氏陽性小桿菌,大小為0.4～0.5μm×0.5～2.0μm;用生理鹽水制成菌懸液,在油鏡或相差顯微鏡下觀察,該菌出現(xiàn)輕微旋轉(zhuǎn)或翻滾樣的運動.
過氧化氫酶試驗：挑取TSA-YE平板上的菌落于潔凈載玻片上，滴加1滴3%的過氧化氫（H2O2）溶液，李斯特氏菌呈過氧化氫酶陽性反應(yīng)。
將上述可疑菌新鮮菌苔置于已配備的無菌生理鹽水中，與1 McFarland的濁度管比濁，將菌懸液制備成1McFarland (約3.0×108cfu/mL )，用吸管吸取2滴（約0.06mL）菌懸液加入每種微量生化管內(nèi)。將已接種的西林瓶再套上膠塞，一般采用全加塞（如圖2左兩瓶所示），特殊情況在下表注明采用半加塞（如圖2右兩瓶所示），直立于內(nèi)托的凹槽內(nèi)（如圖2），或放置于合適的瓶架中，于35－
注意：如有特殊的接種方式、培養(yǎng)時間或培養(yǎng)方式，請詳見每種生化鑒定管附帶的使用說明。
圖1 西林瓶開啟圖 圖2 西林瓶放置培養(yǎng)圖
四）單核細胞增生李斯特氏菌的主要生化特性及有關(guān)菌的區(qū)別見表2。（只供參考）
表2 單核細胞增生李斯特氏菌生化性狀與有關(guān)菌的區(qū)別
菌種
|
溶血反應(yīng)
|
動力試驗
|
葡萄糖
|
麥芽糖
|
MR-VP
|
甘露醇
|
鼠李糖
|
木糖
|
七葉苷
|
單核細胞增生李斯特氏菌
L.monocytogenes
|
＋
|
+
|
＋
|
＋
|
+/+
|
－
|
+
|
－
|
+
|
格氏李斯特氏菌
L.grayi
|
－
|
+
|
＋
|
＋
|
+/+
|
＋
|
_
|
－
|
+
|
斯氏李斯特氏菌
L.seeligeri
|
＋
|
+
|
＋
|
＋
|
+/+
|
－
|
－
|
＋
|
+
|
威氏李斯特氏菌
L.welshimeri
|
－
|
+
|
＋
|
＋
|
+/+
|
－
|
V
|
＋
|
+
|
伊氏李斯特氏菌
L.ivanovii
|
＋
|
+
|
＋
|
＋
|
+/+
|
－
|
－
|
＋
|
+
|
英諾克李斯特氏菌
L.innocua
|
－
|
－
|
+
|
+
|
+/+
|
－
|
V
|
－
|
+
|
注: “+” 陽性；“－” 陰性； “V” 反應(yīng)不定
