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副溶血性弧菌細(xì)菌生化鑒定盒

英文名稱(chēng):

貨 號(hào) :071770

規(guī) 格 :15種×5次/盒

用途:常規(guī)鑒定副溶血性弧菌生化反應(yīng)。

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  071770 副溶血性弧菌細(xì)菌生化鑒定盒(15種×5次)

  一)整套試劑及用品

  鑒定生化反應(yīng)的10種試劑(表1)、10瓶0.85%無(wú)菌生理鹽水、1瓶0.5 McFarland的濁度管、10支一次性吸管。

  二)西林瓶的使用方法

  開(kāi)啟西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在無(wú)菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開(kāi)鋁蓋,撕開(kāi)鋁蓋,打開(kāi)西林瓶膠塞(如圖1)。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。

  三)副溶血性弧菌生化鑒定盒的詳細(xì)使用方法

    副溶血性弧菌為革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌,易呈多形態(tài),有棒狀、弧狀、卵圓狀、球狀、絲狀等,排列不規(guī)則,一般大小為0.3~0.7μm×1~2μm,單端一根鞭毛,有動(dòng)力,運(yùn)動(dòng)活潑,兩端濃染,在固體培養(yǎng)條件下能生長(zhǎng)周鞭毛。菌落常為隆起,圓形,稍渾濁不透明,表面光滑,濕潤(rùn),不產(chǎn)生色素。

    挑取平板分離的可疑菌落劃線(xiàn)接種3%NaCl胰蛋白胨大豆瓊脂平板35-37℃培養(yǎng)18-24h,革蘭氏染色鏡檢,并將新鮮菌苔置于已配備的無(wú)菌生理鹽水中,與0.5 McFarland的濁度管比濁,將菌懸液制備成0.5McFarland ( 約108cfu/mL ),用吸管吸取2滴(約0.06mL)菌懸液加入每種微量生化管內(nèi)。將已接種的西林瓶再套上膠塞,一般采用全加塞(如圖2左兩瓶所示),特殊情況在下表注明采用半加塞(如圖2右兩瓶所示),直立于內(nèi)托的凹槽內(nèi)(如圖2),或放置于合適的瓶架中,于35-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),結(jié)果觀(guān)察見(jiàn)表1。

    注意:如有特殊的接種方式、培養(yǎng)時(shí)間或培養(yǎng)方式,請(qǐng)?jiān)斠?jiàn)每種生化鑒定管附帶的使用說(shuō)明。

表一

產(chǎn)品名稱(chēng)

結(jié)果判定

結(jié)果觀(guān)察

時(shí)間(小時(shí))

使用說(shuō)明

陽(yáng)性

陰性

氧化酶試劑

藍(lán)紫色

不變色

30秒內(nèi)

滴加1滴試劑到一小塊潔凈濾紙上,以剛剛浸濕為宜;用玻棒或接種環(huán)(鉑或塑料)挑取適量新鮮菌苔涂在紙片上。

3%NaCl半固體

擴(kuò)散生長(zhǎng)

無(wú)擴(kuò)散生長(zhǎng)

24—48

用接種針挑取新鮮菌苔穿刺接種,豎立培育。

無(wú)鹽胨水、3%NaCl胨水、6%NaCl胨水、8%NaCl水、10%NaCl胨水

生長(zhǎng)

不生長(zhǎng)

24

 

3%NaCl甘露醇、

3%NaCl蔗糖

3%NaCl乳糖

黃色

紫色

8-24

 

3%NaCl葡萄糖(產(chǎn)氣)

黃色,小倒管有氣泡

紫色,小倒管無(wú)氣泡

18—24

使用前先確定倒管內(nèi)無(wú)氣泡。

3%NaCl賴(lài)氨酸脫羧酶

 

試驗(yàn)管綠色或黃綠色,對(duì)照管變黃

試驗(yàn)管與對(duì)照管均變黃

18-24

每株被檢菌應(yīng)同時(shí)接種氨基酸對(duì)照管一支,并加滅菌液體石蠟3-4滴覆蓋培養(yǎng)基表面。培養(yǎng)18-24小時(shí),未見(jiàn)陽(yáng)性結(jié)果,繼續(xù)培養(yǎng)4天,再做最終結(jié)果判定。

3%NaCl 葡萄糖磷酸鹽胨水(V-P)

紅色

不變色

48

接種培養(yǎng)后依次加入8滴VP試劑甲液及4滴乙液,混勻,再培養(yǎng)10-20分鐘觀(guān)察結(jié)果。

β-半乳糖苷(ONPG)

深黃色

淡黃色或無(wú)色

12-24

 

備注:本鑒定盒是按照環(huán)凱產(chǎn)品目錄中的品種成份從左到右的順序擺放。 

 四)副溶血性弧菌的生化特性見(jiàn)表2 

表2   副溶血性弧菌的生化性狀 

試驗(yàn)項(xiàng)目

結(jié)果

革蘭氏染色鏡檢

陰性,無(wú)芽胞,呈棒狀、弧狀、卵圓狀

氧化酶

+

3%NaCl半固體

穿刺接種處擴(kuò)散生長(zhǎng),有動(dòng)力

無(wú)鹽胨水

-或微弱生長(zhǎng)

8% NaCl胨水

+

10%NaCl胨水

-或微弱生長(zhǎng)

蔗糖

-

乳糖

-

葡萄糖

+

分解葡萄糖(產(chǎn)氣)

-

甘露醇

+

賴(lài)氨酸脫羧酶

+

硫化氫

-

V-P

ONPG

 表3 副溶血性弧菌主要性狀與其他弧菌的鑒別(必要時(shí)做,本鑒定盒沒(méi)有提供整套相應(yīng)的生化管,需另買(mǎi)單盒)

名稱(chēng)

氧化酶

賴(lài)氨酸

精氨酸

鳥(niǎo)氨酸

明膠

脲酶

V ︱P

42℃生長(zhǎng)

蔗糖

D︱纖維二糖

乳糖

 阿拉伯糖

D︱甘露糖

D︱甘露醇

ONPG

嗜鹽性試驗(yàn)

NaCl含量(%)

0

3

6

8

10

副溶血性弧菌

V

V

創(chuàng)傷弧菌

V

溶藻弧菌

霍亂弧菌

V

擬態(tài)弧菌

河弧菌

V

V

弗氏弧菌

梅氏弧菌

V

V

霍利斯弧菌

nd

  注:nd 表示未試驗(yàn);V表示可變。

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