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HKE047-01A Plus All-in-one 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix (gDNA Purge)

英文名稱:Plus All-in-one 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix (gDNA Purge)

貨 號 :HKE047-01A

規(guī) 格 :50次(20μl體系)

用途:高效 合成第一鏈cDNA

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產(chǎn)品名稱:Plus All-in-one 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix (gDNA Purge)
中文名稱:一體式第一鏈cDNA合成超級預(yù)混液(去除gDNA)

產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格:

編號產(chǎn)品名稱規(guī)格產(chǎn)品介紹產(chǎn)品價(jià)格
HKE047-01APlus All-in-one 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix (gDNA Purge)50次(20μl體系)一體式第一鏈cDNA超級預(yù)混液(去除gDNA)645

產(chǎn)品描述:第一鏈cDNA合成預(yù)混液是以mRNA或者總RNA為模板,高效 合成第一鏈cDNA。本產(chǎn)品含有反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)所需的全部試劑 (II Reverse Transcriptase,RNase Inhibitor,Oligo(dT)18,Random N6,dNTPs)。反應(yīng)時(shí)只需要加入RNA模板和水即可,操作簡單,降 低操作過程中的污染。本制品含有去基因組成分gDNA Purge,以 RNA為模板進(jìn)行cDNA第一鏈合成時(shí),可以同步去除基因組DNA污 染,反應(yīng)結(jié)束后,75℃加熱5分鐘,就可以失活反轉(zhuǎn)錄酶,RNA酶 抑制劑。合成的第一鏈cDNA能直接用于PCR 或熒光定量PCR的模 板,第二鏈cDNA的合成或線性RNA擴(kuò)增,也可用于需要用帶有 放射性或非放射性核苷酸標(biāo)記第一鏈cDNA的實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品特點(diǎn):
      本制品采用耐高溫逆轉(zhuǎn)錄酶,大幅提高熱穩(wěn)定性和 cDNA 合 成效率; 
      本制品中添加的II Reverse Transcriptase 無 RNase H 活性,可 避免第一鏈 cDNA 合成過程中,RNA/DNA 雜交模板鏈中 RNA 降解,保證 cDNA 合成的質(zhì)量;
      本制品中 Random N6 和 Oligo(dT)18 引物比例經(jīng)過優(yōu)化,可均 勻合成樣品中的 cDNA;
      本制品中含有去基因組成分,反轉(zhuǎn)錄時(shí)可同步去除基因組 DNA 污染。

保存溫度:-20℃。

產(chǎn)品包裝:

一體式第一鏈cDNA合成超級預(yù)混液(去除gDNA)產(chǎn)品包裝

注意事項(xiàng):
      1)用DEPC 處理實(shí)驗(yàn)用到的所有實(shí)驗(yàn)器材,或者 購買已經(jīng)證明無核酸酶的實(shí)驗(yàn)用具,實(shí)驗(yàn)過程戴 手套并經(jīng)常更換手套,避免 RNA 酶的污染。 
      2)確保所用試劑中無 RNA 酶污染。 
      3) 試劑盒要嚴(yán)格密封保存。在反轉(zhuǎn)錄過程中,所 有管子要確??蹏?yán)。 
      4) 純化過的RNA 必須保證不含有鹽,金屬離子, 乙醇和苯酚,以上成分會干擾第一鏈 cDNA 的合 成反應(yīng)。可采用乙醇沉淀RNA 的方法去除掉痕量 污染物。 
      5) 為保證反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的有效進(jìn)行,需使用高質(zhì)量 的RNA 模板。 
      6) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,最快逆轉(zhuǎn)錄速度可達(dá)2kb/min, 需要提高反轉(zhuǎn)錄效率或模板含量較低時(shí)可以適當(dāng) 延長反轉(zhuǎn)錄時(shí)間。

操作方法與常用PCR 循環(huán):

一體式第一鏈cDNA合成超級預(yù)混液(去除gDNA)操作方法與常用PCR循環(huán)

注意:當(dāng) RNA 濃度較高或目標(biāo)基因?qū)俑呖截惢驎r(shí),可將去基因組 和逆轉(zhuǎn)錄合為一步操作,更省時(shí)省力。所有組分加到一起,50℃孵 育15-30min,最后75℃孵育5min 終止反應(yīng)即可。

客戶應(yīng)用實(shí)例與本試劑盒在 37℃條件下保存的穩(wěn)定性驗(yàn)證:

一體式第一鏈cDNA合成超級預(yù)混液(去除gDNA)相關(guān)實(shí)例

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