細(xì)菌新型生化鑒定管使用說(shuō)明
―― 071910 嗜肺軍團(tuán)菌生化鑒定盒（7種×10次）
一）整套試劑及用品
鑒定生化反應(yīng)的7種培養(yǎng)基各10瓶（表1）、配套試劑（茚三酮試劑、硝酸鹽還原試劑甲、乙液）各1瓶，無(wú)菌生理鹽水10瓶、0.5 McFarland的濁度管1支、一次性吸管10支、使用說(shuō)明書一份。
二）生化管的使用方法
開啟西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面，在無(wú)菌條件下，按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋，撕開鋁蓋，打開西林瓶膠塞（如圖1）。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
三）軍團(tuán)菌生化鑒定盒的詳細(xì)使用方法
挑取待檢菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，軍團(tuán)菌為革蘭氏陰性桿菌。將新鮮菌苔接種于普通肉湯中37℃培養(yǎng)18－24h或用0.85%無(wú)菌生理鹽水稀釋至0.5 McFa-rland(約108cfu/mL), 各吸取0.05－0.08mL（約1～2滴）的肉湯培養(yǎng)物或菌懸液加入每種微量西林瓶?jī)?nèi)。（一般生化按此操作，有特殊要求的見表1）將接種后的西林瓶再套上膠塞，一般采用全加塞（如圖2左兩瓶所示），特殊情況在下表注明采用半加塞（如圖2右兩瓶所示），直立于內(nèi)托的凹槽內(nèi)（如圖2），或放置于合適的瓶架中，于35－37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，結(jié)果觀察見下表1。注意：如有特殊的接種方式、培養(yǎng)時(shí)間或培養(yǎng)方式，詳見每種生化鑒定管附帶的使用說(shuō)明。
| 產(chǎn)品名稱 | 結(jié)果判定 | 培養(yǎng)時(shí)間 | 使用說(shuō)明 | |
| 陽(yáng)性 | 陰性 | (小時(shí)) | ||
| 葡萄糖（軍團(tuán)菌） | 黃色 | 紫色 | 18－24 | 接種培養(yǎng)后觀察顏色變化 |
| 乳糖（軍團(tuán)菌） | 黃色 | 紫色 | 18－24 | 同上 |
| 麥芽糖（軍團(tuán)菌） | 黃色 | 紫色 | 18－24 | 同上 |
| 硝酸鹽（還原）（軍團(tuán)菌） | 深紅色 | 無(wú)色或者略帶淡粉紅色 | 18-24 | 接種培養(yǎng)后加硝酸鹽還原試劑甲、乙液各2滴，混勻，立即觀察結(jié)果。 |
| 尿素（軍團(tuán)菌） | 桃紅色 | 淡橙紅色(不變色)或黃色 | 12-24 | 打開西林瓶膠塞后，向西林瓶中加入所配備的1.5mL/瓶的無(wú)菌水，充分溶解。再用接種針挑取新鮮菌苔直接接種于西林瓶?jī)?nèi)。接種后，置于35-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12-24h，觀察結(jié)果。 |
| 明膠（軍團(tuán)菌） | 4℃液態(tài) | 4℃固態(tài) | 48-72 | 用接種針挑取新鮮菌苔穿刺接種，37℃培養(yǎng)后置4℃冰箱10分鐘后觀察結(jié)果。 |
| 馬尿酸（軍團(tuán)菌） | 紫色 | 黃色 | 4 | 用接種環(huán)挑取3-4環(huán)菌苔接種后，35-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4h或者35-37℃水浴2h，加茚三酮試劑0.2mL，在35-37℃水浴鍋或者培養(yǎng)箱10min。如果仍不變色，可用未滴加試劑的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)至24h再加茚三酮試劑，觀察結(jié)果。 |
四）嗜肺軍團(tuán)菌的生化鑒定特征（只供參考）
類（葡萄糖、乳糖、麥芽糖）發(fā)酵陰性（—），硝酸鹽還原陰性（—），尿素酶陰性（—），明膠液化陽(yáng)性（+），水解馬尿酸（+）。
