微生物實(shí)驗(yàn)之“芽管試驗(yàn)＂
發(fā)布時(shí)間：2025-02-24 瀏覽次數(shù)：857
芽管試驗(yàn)（Germ tube test）是一種用于快速鑒定白色念珠菌（Candida albicans）的常用方法。 該試驗(yàn)通過觀察酵母細(xì)胞在特定條件下是否能夠形成芽管來區(qū)分白色念珠菌和其他酵母菌。
原理與方法
芽管試驗(yàn)的基本原理是白色念珠菌在含有營養(yǎng)成分的液體培養(yǎng)基中，特別是在37°C下培養(yǎng)2-4小時(shí)后，能夠形成芽管。 芽管是一種短小、無隔膜的發(fā)芽酵母絲，其寬度約為原細(xì)胞寬度的一半，長度是原細(xì)胞長度的三到四倍。
操作步驟
1、材料準(zhǔn)備：取0.5-1.0 mL人或動(dòng)物血清，加入到接種環(huán)中。
2、培養(yǎng)條件：將接種環(huán)輕輕觸碰待測菌落，然后將血清滴入培養(yǎng)皿中，置于35-37°C的恒溫箱中培養(yǎng)3小時(shí)。
3、顯微鏡觀察：培養(yǎng)后，取一滴培養(yǎng)液涂片，覆蓋一層薄薄的玻璃片，在低倍鏡下觀察芽管的存在或缺失。 若在高倍鏡下確認(rèn)芽管，則可判定為白色念珠菌。
敏感性和特異性
芽管試驗(yàn)的敏感性和特異性通常較高。 研究表明，使用人血清進(jìn)行芽管試驗(yàn)時(shí)，敏感性可達(dá)98%-100%，特異性也接近100%。 然而，需要注意的是，熱帶念珠菌（Candida tropicalis）有時(shí)也會(huì)產(chǎn)生假陽性結(jié)果。 血瓊脂培養(yǎng)基（BHI)也是一種有效的誘導(dǎo)劑，其敏感性和特異性分別為96%和97%。胰蛋白胨水的敏感性和特異性較低，分別為85%和67%。穆勒-亨利培養(yǎng)基（MH）的敏感性和特異性較高，分別為93%和92%。
影響因素
1、溫度：最佳溫度為37°C。
2、培養(yǎng)基：不同的培養(yǎng)基對芽管形成的影響不同。 例如，人血清和BHI（Brain Heart Infusion）培養(yǎng)基是較好的誘導(dǎo)劑。
3、培養(yǎng)時(shí)間：培養(yǎng)時(shí)間過長可能導(dǎo)致非白念珠菌菌株誤判為陽性。
4、接種量：接種量不足可能影響芽管的形成。
局限性
芽管試驗(yàn)廣泛應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室中，用于快速鑒定白色念珠菌。 然而，該方法也存在一些局限性：
1、熱帶念珠菌有時(shí)也會(huì)產(chǎn)生芽管導(dǎo)致假陽性產(chǎn)生;
2、某些白念珠菌菌株可能不形成芽管;
3、新鮮血清或冷凍血清均可用于芽管試驗(yàn)，但冷凍血清可能會(huì)影響結(jié)果;
4、使用人血清時(shí)需注意可能攜帶的病毒（如HIV、乙型肝炎病毒等），因此建議使用非人血清基質(zhì)作為替代;
5、環(huán)境條件（如溫度、濕度）可能影響芽管的形成。
芽管試驗(yàn)是一種簡單、快速且可靠的初步鑒定白色念珠菌的方法。 盡管存在一定的局限性，但通過優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件和選擇合適的誘導(dǎo)劑，可以顯著提高試驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。
文章來源：環(huán)凱轉(zhuǎn)載于“ 檢驗(yàn)世界”公眾號；原標(biāo)題：“微生物實(shí)驗(yàn)之“芽管試驗(yàn)＂”；作者~腳丫。
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