近日，省科學(xué)院微生物研究所微生物安全與健康研究中心吳清平院士與客座研究員丁郁團(tuán)隊(duì)合作開發(fā)了高靈敏檢測(cè)大腸桿菌O157:H7的新方法。
傳統(tǒng)的基于膠體金納米顆粒的比色免疫層析試紙條存在靈敏度不足的固有缺陷，阻礙了低豐度目標(biāo)物的檢測(cè)應(yīng)用。具有信號(hào)放大潛力的金屬生長(zhǎng)策略能夠極大地提高試紙條的檢測(cè)靈敏度，其原理和方法是通過將顯色試紙條浸泡于增強(qiáng)液中，金屬離子在還原劑作用下以膠體金為核心，聚集于膠體金表面還原成金屬單質(zhì)，從而沉積于膠體金探針表面形成納米殼層，顯著增強(qiáng)膠體金探針信號(hào)強(qiáng)度。
金、銀和銅生長(zhǎng)是擴(kuò)大金納米顆粒尺寸最常用的策略。其中銅作為一種廉價(jià)的金屬，因其在催化領(lǐng)域的優(yōu)勢(shì)受到廣泛關(guān)注。但是金和銅的晶格常數(shù)相差很大，引起晶格失配。具有大晶格失配的金屬納米殼層的生長(zhǎng)過程和形狀控制合成不可控。此外，基于試紙條浸泡的金屬生長(zhǎng)策略中，銅可以沉積到現(xiàn)有的金納米顆?；蚧妆砻妫貏e是硝酸纖維素膜特有的處理工藝使額外添加的銅離子在孵育時(shí)易吸附，導(dǎo)致假陽性結(jié)果或者出現(xiàn)明顯背景。這種模式容易受到環(huán)境和操作者的影響，需要精確把握操作流程，大大限制了該方法在實(shí)踐中的推廣應(yīng)用。
本研究引入聚丙烯胺鹽酸鹽介導(dǎo)的銅生長(zhǎng)可控模型，消除了銅離子在硝酸纖維素膜上的非特異性吸附，從而提供了最大化且有效的信噪比，實(shí)現(xiàn)了對(duì)強(qiáng)致病性大腸桿菌O157：H7的高靈敏檢測(cè)。此外，新開發(fā)的檢測(cè)方法具有良好的重現(xiàn)性(變異系數(shù)小于13%)、顯著的穩(wěn)定性和實(shí)用性。聚丙烯胺鹽酸鹽介導(dǎo)的信號(hào)增強(qiáng)系統(tǒng)為實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定金屬生長(zhǎng)方法鋪平了道路，并廣泛適用于金納米顆粒免疫層析檢測(cè)平臺(tái)。
來源：微生物安全與健康網(wǎng)
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