GB 4789.4-2024沙門氏菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)變更要點(diǎn)匯總
發(fā)布時(shí)間：2024-03-14 瀏覽次數(shù)：1600
來源：“六扇門Study”公眾號，作者~SIXDoors
2023年4月，GB4789.4-2024標(biāo)準(zhǔn)終于發(fā)布啦！以下是24年版沙門氏菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)變更要點(diǎn)內(nèi)容：
重點(diǎn)變更1：“乳粉樣品從混勻，改用室溫浸泡1小時(shí)后再進(jìn)行預(yù)增菌”
標(biāo)準(zhǔn)修改原因：
乳粉經(jīng)過高溫噴霧干燥，其中的沙門氏菌都處于受損狀態(tài)；乳粉水活度低，其中幸存的沙門氏菌適應(yīng)了干燥的環(huán)境。如果乳粉在BPW中快速混勻迅速水化，受損的沙門氏菌會(huì)出現(xiàn)滲透壓休克；乳粉在BPW中室溫浸泡1小時(shí)緩慢水化，受損的沙門氏菌可以得到復(fù)蘇。
標(biāo)準(zhǔn)的修訂過程做了大量驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，如：人工模擬熱損傷沙門的乳粉浸泡法與混勻法比對試驗(yàn)，結(jié)果表明浸泡法的檢出率更高。
自然污染了山夫登堡沙門氏菌的大豆粉，大豆粉也經(jīng)過了高溫噴霧干燥，水活度較低，與乳粉類似。
結(jié)果表明，浸泡法陽性率90%， 混勻法陽性率60%，BPW 44℃預(yù)溫后再混勻的陽性率只有40%。
操作注意事項(xiàng)：
?將乳粉輕輕緩慢傾倒在BPW的液面；
?勿混勻勿調(diào)節(jié)pH，室溫靜置60 min±5min；
?靜置完后再混勻，培養(yǎng)；
?BPW勿預(yù)溫。
重點(diǎn)變更2：選擇性增菌培養(yǎng)基，采用RVS 代替 SC
標(biāo)準(zhǔn)修改原因：
亞硒酸鹽胱氨酸增菌液SC主要適用于傷寒沙門氏菌的選擇性增菌；但通過疾病監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，我國傷寒與副傷寒的發(fā)病率逐年下降，目前發(fā)病率為0.8 /10 萬。
然而，非傷寒沙門氏菌發(fā)病率高達(dá)560 /10 萬（《我國零售雞肉中非傷寒沙門氏菌污染對人群健康影響的初步定量風(fēng)險(xiǎn)評估20210526》），在微生物引發(fā)的食源性疾病中排前2位。
從培養(yǎng)基成分差異來看，RVS中含有孔雀綠，能夠抑制非沙門氏菌的生長，大豆蛋白胨有利于沙門氏菌的復(fù)蘇；SC增菌液配置需要亞硒酸氫鈉，其具有一定毒性，健康環(huán)保方面也存在安全風(fēng)險(xiǎn)，且原料不穩(wěn)定，受溫度影響較大，容易變性而造成培養(yǎng)基功能失效 。送上兩種培養(yǎng)基的配方成分：
亞硒酸鹽胱氨酸(SC)增菌液：蛋白胨 5.0g，乳糖 4.0g，磷酸氫二鈉 10.0g，亞硒酸氫鈉 4.0g，L-胱氨酸 0.01g，蒸餾水 1000mL。
氯化鎂孔雀綠大豆胨（RVS）增菌液：大豆蛋白胨 4.5 g，氯化鈉 7.2 g，磷酸二氫鉀 1.26 g，磷酸氫二鉀 0.18 g，氯化鎂（含 6 個(gè)結(jié)晶水） 28.6 g，孔雀綠 0.036 g，蒸餾水 1 000 mL。
操作注意事項(xiàng)：
1、用RVS代替SC，BPW的接種量改為0.1mL，選擇性增菌溫度為42 ℃±1 （主要是減少帶入到RVS中的背景菌）；
2、RVS的質(zhì)量很關(guān)鍵，培養(yǎng)基要謹(jǐn)慎選擇。
重點(diǎn)變更3：TTB選擇性增菌改為：低背景菌36 ℃±1 ℃，高背景菌42 ℃±1 ℃
標(biāo)準(zhǔn)修改原因：
1、驗(yàn)證試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，對于生鮮樣品，TTB 42 ℃比TTB 36 ℃的選擇性好，所以繼續(xù)沿用；
2、驗(yàn)證試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，對于深加工樣品，TTB 36 ℃比TTB 42 ℃生長好，所以低背景菌采用36 ℃±1 ℃培養(yǎng)；
3、相關(guān)權(quán)威方法，如BAM中一直有相關(guān)規(guī)定。
操作注意事項(xiàng)：
1、將BPW接種到TTB后，一定要混勻；
2、TTB基礎(chǔ)煮沸殺菌，使用當(dāng)天再加碘液和煌綠；
3、絕大部分預(yù)包裝食品是低背景菌，生禽肉等初級農(nóng)產(chǎn)品屬于高背景菌樣品；
4、背景菌不明的樣本，如PT樣品， 36 ℃±1 ℃和42 ℃±1 ℃兩個(gè)溫度同時(shí)培養(yǎng)。
重點(diǎn)變更4：預(yù)增菌培養(yǎng)物、選擇性培養(yǎng)物可4℃冷藏不超過72h
修改原因是：
1、 驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)，預(yù)增菌培養(yǎng)物、選擇性培養(yǎng)物4℃冷藏不超過72小時(shí)，不會(huì)影響后續(xù)檢驗(yàn)。
2、 相關(guān)權(quán)威方法，如ISO 和BAM中都有相關(guān)規(guī)定。
3、減少周末加班！
