推薦閱讀
- GB4789.11-2014 β型溶血性鏈球菌檢驗及其注意事項
- 更新 | GB4789.10-2016金黃色葡萄球菌檢驗及其注意事項
- 更新 | GB 4789.9-2014 空腸彎曲菌檢驗及注意事項
- 更新 | GB4789.8-2016 小腸結腸炎耶爾森氏菌檢驗及其注意事項
- 環(huán)凱生物酶底物法檢測系統(tǒng)(含質控樣)-酶底物法檢測水中總大腸菌群、糞（耐熱）大腸菌群、大腸埃希氏菌解決方案！
- 乳與乳制品中需氧芽孢及嗜熱需氧芽孢數(shù)的測定
- 國內(nèi)外藥典中黃曲霉毒素的測定方法
- 飲用水中銅綠假單胞菌的污染、控制及檢驗
- 化妝品微生物檢驗中菌落總數(shù)檢驗方法所用培養(yǎng)基配方制法（摘抄《化妝品安全技術規(guī)范》）
- 化妝品微生物檢驗 培養(yǎng)基試劑系列產(chǎn)品
我們經(jīng)常看見這樣的報道，某某飲用水廠商的一批飲用水中被查出銅綠假單胞菌超標，飲用水呈綠色，網(wǎng)友們紛紛調(diào)侃，水都不能喝了，該怎么生存？那么銅綠假單胞菌到底是什么？它是如何進入到飲用水中的？我們該如何預防這種細菌的侵害？
銅綠假單胞菌( P.Aeruginosa )
一種重要的水源性致病菌，廣泛存在于各類型水中，對消毒劑、干燥、紫外線等理化因素及不良環(huán)境具有很強的抵抗力；作為條件致病菌，可能引起急性腸道炎、腦膜炎、敗血癥和皮膚炎癥等疾病。因此，監(jiān)測分析其污染原因并進行有效控制顯得尤為重要。
1 銅綠假單胞菌如何進入飲用水中的？
瓶（桶）裝水中銅綠假單胞菌的污染主要原因有水源受到污染，或現(xiàn)有的較為簡單的水生產(chǎn)加工工藝；或生產(chǎn)過程中衛(wèi)生控制不嚴格，從業(yè)人員未經(jīng)消毒的手直接與礦泉水或容器內(nèi)壁接觸；或包裝材料未進行徹底清洗消毒。
2 檢驗
檢查食品（飲用水）中的銅綠假單胞菌成為食品抽檢必不可少的檢測項目，以檢測飲用水為例列舉銅綠假單胞菌的檢測方法（GB 8538-2016 食品安全國家標準 飲用天然礦泉水檢驗方法）：
一、檢驗流程：
二、操作步驟：
1，水樣過濾
在100級的潔凈工作臺進行過濾操作。首先用無菌鑷子夾取滅菌濾膜邊緣部分,將粗糙面向上,貼放在已滅菌的濾床上，固定好濾器,將250mL水樣或稀釋液通過孔徑0.45μm的濾膜過濾,然后將過濾后的濾膜貼在已制備好的CN瓊脂平板上，平鋪并避免在濾膜和培養(yǎng)基之間夾留著氣泡。
2，培養(yǎng)
將平板倒置于36℃士1 C培養(yǎng)24 h~48 h,并防止干燥。
3，結果觀察
在培養(yǎng)20 h~24 h和40 h~48 h后觀察濾膜上菌落的生長情況并計數(shù)。
計數(shù)所有顯藍色或綠色(綠膿色素)疑似銅綠假單胞菌的菌落，并進行綠膿菌素確證性試驗。
在紫外線下檢查濾膜時,應避免長時間在紫外光下照射,否則可能會將平板上的菌落殺滅,而導致無法在證實培養(yǎng)基上生長。計數(shù)濾膜上所有發(fā)熒光不產(chǎn)綠膿色素疑似銅綠假單胞菌菌落,并進行乙酰胺肉湯確證性試驗。
將其他所有紅褐色不發(fā)熒光的菌落進行氧化酶測試、乙酰胺液體培養(yǎng)基、金氏B培養(yǎng)基確證性試驗,培養(yǎng)20 h~24 h觀察結果,防止因為培養(yǎng)40 h~48 h導致菌落過分生長而出現(xiàn)菌落融合。
在CN瓊脂上生長的菌落選擇和驗證步驟見表31。
三、生化鑒定
1、若CN板上是藍綠色（如下圖）疑似銅綠假單胞菌的菌落,需進行綠膿菌素確證性試驗
綠膿菌素試驗：取可疑菌落2個~3個,分別接種在綠膿菌素測定培養(yǎng)基上,置36℃±1℃培養(yǎng)24h±2h,加入三氯甲烷3mL~5mL,充分振蕩使培養(yǎng)物中的綠膿菌素溶解于三氯甲烷液內(nèi),待三氯甲烷提取液呈藍色時,用吸管將三氯甲烷移到另一試管中并加入1mol/L的鹽酸1mL左右,振蕩后,靜置片刻。如上層鹽酸液內(nèi)出現(xiàn)粉紅色到紫紅色時為陽性,表示被檢物中有綠膿菌素存在。
1.1綠膿菌素測定培養(yǎng)基中加入三氯甲烷后的顏色（如下圖）
1.2用吸管將三氯甲烷移到另一試管內(nèi)加入鹽酸，振蕩，靜置（如下圖）
1.3藍色菌落呈粉紅色，綠色菌落呈淡粉色，有綠膿菌素存在。
2、若CN板上有熒光（如下圖）
按照GB85538-2016標準，產(chǎn)熒光（非藍綠）要進行產(chǎn)氨實驗。
2.1將產(chǎn)熒光的菌落的純培養(yǎng)物接種到乙酰胺肉湯中36℃培養(yǎng)24h，加入鈉氏試劑（如下圖）。
3、若CN板上是紅褐色
按照GB85538-2016標準，紅褐色菌落要進行產(chǎn)氨試驗、氧化酶試驗。金氏B產(chǎn)熒光試驗。
鑒于本人經(jīng)驗有限，接觸樣品不多，買的標準菌株也是綠色形態(tài)（前面那株藍色菌落也是樣品中發(fā)現(xiàn)的，甚是寶貴）。所以，至今未見過紅褐色菌落，若有同行有檢出或者見過，還望交流，多加學習。
3.1標準菌株形態(tài)（如下圖）
3.2產(chǎn)氨實驗（同上，略）
3.3氧化酶試驗（如下圖）
3.4金氏B產(chǎn)熒光試驗（如下圖）
4、其他
其他非前面三種，則判斷不是銅綠假單胞菌。
來源：食品論壇網(wǎng)友原創(chuàng)分享、國標等，食品微生物檢測小編編輯整理，圖片來源網(wǎng)絡、圖怪獸等，轉載請注明來源。
