如何做好培養(yǎng)基的灌裝16步。
發(fā)布時間:2022-04-20 瀏覽次數(shù):2093
文章來源:制藥人職場加油站 公眾號
得到在無菌生產(chǎn)過程中是否會發(fā)生容器、未分裝產(chǎn)品及灌裝產(chǎn)品、未分裝產(chǎn)品及灌裝產(chǎn)品被微生物侵入的直觀信息,這一工藝是否具備可靠地生產(chǎn)無菌產(chǎn)品的基本能力,是非常有價值的,因此,無菌生產(chǎn)中培養(yǎng)基灌裝 (工藝模擬試驗)是:
◆工藝驗證中關(guān)于產(chǎn)品無菌保證的最重要的部分;
◆是對于無菌生產(chǎn)工藝的檢查中必須要考慮的點;
這一點,在眾多的相關(guān)法規(guī)中,也有所體現(xiàn):
◆EU Guidelines to Good Manufacturing Practice,Annex I 約半頁紙長的文字說明了原則要求
◆FDA Guidance for Industry: Sterile DrugProducts Produced by Aseptic Processing (2004): 詳細(xì)的要求,7 頁。
◆ISO 13408-1 Aseptic processing of healthcare products, 1998 (draft of revised version from 2006 available) 詳細(xì)要求, 5 頁。
◆USP <1116>Microbiological Evaluation ofClean Rooms and other Controlled Environments 短的部分說明了原則要求 ,參照 FDA Aseptic Guide,(Ph.Eur. 5.1.1 中只有一句話)。
◆PIC Recommendation on the Validation ofAseptic Processes(詳細(xì)要求, 7頁, 對不同劑型有專門的說明,但其接受標(biāo)準(zhǔn)不再有效,但其接受標(biāo)準(zhǔn)不再有效)
◆Guide to Inspections of sterile Drugsubstance Manufacturer, FDA 1994 最佳操作規(guī)范:
◆PDA Technical Report No. 28, ProcessSimulation Testing for Sterile Bulk Pharmaceutical Chemicals, RevisedSupplement 2006 (非常詳細(xì)的建議, 對于BPCs有專門的解決方案)。
◆PDA Technical Report No.22 1996,Process Simulation Testing for Aseptically Filled Products ( 非常詳細(xì), 重原理不重具體要求)。
如何確保無菌制造產(chǎn)品的無菌性?通過什么來證實這個過程的有效性?又如何做好培養(yǎng)基的灌裝,確保它給出了不切實際的錯誤訊息?
我們都知道,無菌制造產(chǎn)品的無菌保證是基于以下各點的聯(lián)合作用:
A.設(shè)施及制造工藝的設(shè)計
B.適當(dāng)?shù)脑O(shè)備 / 設(shè)備的滅菌
C.生產(chǎn)過程控制
E.驗證
F.原料的生物負(fù)荷
G.人員培訓(xùn)及實際操作
H.測量系統(tǒng),包括環(huán)境及人員的監(jiān)控
這些要素能夠有效地共同運作的能力, 是通過工藝模擬試驗即培養(yǎng)基灌裝來證實的,但是: 這些研究的價值在于,它只是實際生產(chǎn)過程的真實表現(xiàn),因此工藝模擬必須盡量與實際生產(chǎn)過程參數(shù)一樣。另外:培養(yǎng)基灌裝甚至比最差情況挑戰(zhàn)還要嚴(yán)格,因為幾乎在所有情況下,微生物在培養(yǎng)基中的增殖要比在實際產(chǎn)品中更容易。
總體上來說,要做好培養(yǎng)基的灌裝研究,需要關(guān)注以下16要點:
1.培養(yǎng)基灌裝研究所包含的操作:
A.模擬必須包括產(chǎn)品成為無菌狀態(tài)后的所有應(yīng)用的無菌生產(chǎn)工藝步驟 (如轉(zhuǎn)運, 灌裝, 裝載/卸載, 凍干, 加塞, 軋蓋)
B.模擬必須包括所有的無菌處理 (如灌裝線的設(shè)置, 無菌連接, 人員的介入操作)
C.培養(yǎng)基灌裝研究不包括非無菌混合操作或產(chǎn)品的除菌工藝 (如無菌過濾)
D.培養(yǎng)基的制備和滅菌可以與產(chǎn)品的制備/除菌工藝采用不同的方式
2:實驗的頻率和數(shù)量 (每條灌裝線的最小數(shù)量):
A.對于新的產(chǎn)品/設(shè)備/設(shè)施的首次驗證:三個連續(xù)的循環(huán);常規(guī)的每半年的再驗證:一個培養(yǎng)基灌裝循環(huán),以證明狀態(tài)是受控的!
B.再驗證(對初始驗證的重復(fù))的原因: 在沒有確切原因的情況下超出行動限度, 無菌工藝及/或設(shè)備的重大變化, 最終產(chǎn)品的無菌試驗顯示產(chǎn)品污染,長時間的停產(chǎn)。
3.產(chǎn)品/容器匹配的矩陣解決方案一條灌裝線生產(chǎn)多個產(chǎn)品時,根據(jù)下列因素可被劃分為不同的表型組:
A.灌裝工藝
B.不同的容器密封方式
C.由此選出兩個或更多個在下列方面能涵蓋所有其它相關(guān)產(chǎn)品的產(chǎn)品:
D.容器的大小、開放或密封的設(shè)計
E.灌裝線的速度和介入
F.涉及的操作人員數(shù)量
G.凍干, 貯存容器的形式
這些“矩陣產(chǎn)品” 都要包含在首次驗證和再驗證中。
4.培養(yǎng)基灌裝實驗采用的批量:
H.對于大多數(shù)傳統(tǒng)的灌裝工藝,5.000 到 10.000 單位就足夠了
I.對于高速灌裝線可能需要更多的單位
J.對于生產(chǎn)批量小于 5.000 的產(chǎn)品,培養(yǎng)基灌裝的單位數(shù)應(yīng)該至少等于日常生產(chǎn)的最大批量
5.培養(yǎng)基灌裝過程中的注意事項:模擬灌裝必須充分,要包括一定數(shù)量的典型介入和非典型的介入行為,數(shù)量要有代表性
A.必須包括停機和最大放置時間
B.必須包括更衣和倒班——如果這是正常生產(chǎn)的一部分
6.培養(yǎng)基的選擇:
A.適宜促進寬范圍的微生物生長,如大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基(胰蛋白酶 大豆肉湯,TSB)
B.干粉工藝:具備與干粉產(chǎn)品流動性能相似的無菌TSB干粉或無菌安慰劑粉末(乳糖,甘露醇…)
C.培養(yǎng)基應(yīng)該支持需氧菌生長,也支持厭氧菌的生長(皮膚生長的菌)
D.對于會形成嚴(yán)格厭氧環(huán)境的工藝:硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基 (FTM)能夠支持真正的厭氧菌的生長(如果在環(huán)境監(jiān)測樣品或無菌試驗中檢出厭氧菌這樣做也是必需的)
7.培養(yǎng)基的促生長試驗:
A.必須用藥典要求的標(biāo)準(zhǔn)微生物及工廠特定微生物(分離自環(huán)境監(jiān)測及無菌試驗)來進行
B.至少在培養(yǎng)期結(jié)束時應(yīng)該進行。
C.挑戰(zhàn)水平必須 < 100 CFU/單位。
8.灌裝體積:選擇的體積要使培養(yǎng)基能適當(dāng)?shù)亟佑|容器內(nèi)表面,并且當(dāng)翻轉(zhuǎn)或旋轉(zhuǎn)時能接觸到封口處的內(nèi)表面。
A.25%至40%的頂空能確保獲得足夠的氧。
B.對于厭氧灌裝: 用惰性氣體代替氧氣,并使之完全充滿容器。
9.灌裝單位的培養(yǎng):
A.通常: 所有在工藝模擬中生產(chǎn)的培養(yǎng)基必須進行培養(yǎng)。
B.被排除在外未進行培養(yǎng)的單位,必須清楚地說明排除的合理性。
C.對于因容器破損而丟棄的單位,要求同日常生產(chǎn)一樣。
D.完整的單位必須被培養(yǎng),包括那些存在外觀缺陷的單位。
10.培養(yǎng)條件:
A.足夠的培養(yǎng)時間,以確保那些脆弱的或受損的微生物也能得到恢復(fù)并增殖(不少于14天)。
B.培養(yǎng)期間溫度不超出 20-35℃的范圍
C.如果用兩個溫度培養(yǎng),從較低的溫度開始,中間要觀察結(jié)果
11.凍干法的模擬:
A.嚴(yán)格地用培養(yǎng)基模擬凍干工藝顯然有難度(如循環(huán)可能持續(xù)幾天)
B.應(yīng)該首先識別有污染風(fēng)險的活動,并加以模擬(如未完全密封小瓶的轉(zhuǎn)運,凍干機的裝載……)
C.凍干循環(huán)的模擬,應(yīng)該采用一次或多次的部分真空
D.小瓶必須不被冷凍
E.注意確保培養(yǎng)基的需氧狀態(tài)。
12.與人員相關(guān)的考慮:
A.在進行培養(yǎng)基灌裝時要出現(xiàn)最大的人員數(shù)量。
B.所有受權(quán)進入無菌操作間的人員(包括技術(shù)人員和維護人員)必須至少每年參加一次培養(yǎng)基灌裝。
C.進行有代表性數(shù)目、類型及復(fù)雜性的正常日常介入。
D.還要模擬非常規(guī)或非典型性介入/事件(維護,停機,設(shè)備調(diào)整)。
E.必須考慮操作人員的疲勞狀態(tài)(如夜班)。
F.管理人員要評估每個操作人員對于書面操作程序的符合性(如錄像資料)。
13.單位的檢查:
A.目檢是否有生長
B.單位的處理,要確保能檢出在容器處或封口表面處的污染
C.要由經(jīng)過培訓(xùn),并且有資格能夠發(fā)現(xiàn)微生物生長跡象的人員進行
D.在兩個溫度下培養(yǎng)時必須進行中間判讀
E.可疑單位立即交給質(zhì)量控制的微生物人員
14.環(huán)境監(jiān)測:
A.進行總的懸浮粒子數(shù)及微生物的監(jiān)測
B.監(jiān)測必須覆蓋所有的無菌工藝步驟,包括設(shè)置過程及設(shè)置人員
C.取樣點,測試頻率及樣品數(shù)量應(yīng)該與常規(guī)生產(chǎn)相同或更多以證實日常環(huán)境狀況
15.所有劑型及所有無菌工藝的研究方案的總的要求
A.工藝模擬試驗應(yīng)該盡可能接近地模仿日常生產(chǎn)過程 ( 包括最差情況)
B.公司內(nèi)對于培養(yǎng)基灌裝中所要模擬的條件和活動的基本原則應(yīng)有詳細(xì)的說明
C.培養(yǎng)基灌裝不能用作出現(xiàn)不必要的污染風(fēng)險行為的理由。
16.接受標(biāo)準(zhǔn)與試驗結(jié)果的判斷:目標(biāo)是零污染,任何污染都是客觀事實,應(yīng)進行調(diào)查.警報/行動水平如下:
A.當(dāng)灌裝少于 5000 單位時,不得檢出污染單位,如果存在一個污染單位(行動水平),則需要啟動調(diào)查,并進行再驗證。
B.當(dāng)灌裝數(shù)量為5.000至10.000或更多單位時: 一個單位被污染 (警報水平)則需要啟動調(diào)查,并考慮是否需要重復(fù)培養(yǎng),如果存在兩個單位被污染 (行動水平),需要啟動調(diào)查,并進行再驗證,污染單位必須與培養(yǎng)基灌裝期間采取的模擬行為和其發(fā)生時間是相關(guān)聯(lián)的。
C.必須有一個詳細(xì)的書面程序,規(guī)定出現(xiàn)培養(yǎng)基灌裝超出警報/行動水平時的處理程序,這里存在著大量的調(diào)查工作及文件記錄。