微生物檢測能力驗證能力考核要點！
發(fā)布時間：2022-04-15 瀏覽次數(shù)：1517
一、什么是能力驗證
實驗室能力驗證，通俗地講，就是評價一個實驗室有無開展某項檢驗檢測活動、出具合法有效的檢驗檢測報告的能力。能力驗證的目的是保證實驗室的運行滿足質(zhì)量管理的要求，出具的結(jié)果公平公正、合法有效。
能力驗證要從兩個方面來入手：
第一，硬件：是否具備與所要從事的檢驗檢測活動相匹配的場地、人員、設(shè)備。
第二，軟件：人員的能力是否滿足要求，實驗室的管理運行是否滿足要求。
二、實驗室收到盲樣菌株標本后
1、操作前仔細閱讀參指導(dǎo)書，尤其小的備注要注意，很多特殊情況的處理大都在備注里。
2、樣品接收前的檢查很重要，首先對樣品的完整性進行檢查，對信息的閱讀要全面，如果發(fā)現(xiàn)樣品有問題及時溝通，這樣要比做樣品的時候在發(fā)現(xiàn)來的要及時，能節(jié)省不少的時間；
3、作業(yè)指導(dǎo)書的閱讀要到位，很多能力驗證樣品寄到后要跟一份作業(yè)指導(dǎo)書，作業(yè)指導(dǎo)書中往往會對本次能力驗證的樣品、成分、尺寸、選擇方法、樣品的結(jié)果記錄、包括修約或樣品的粘貼、樣品寄發(fā)的注意事項等有明確的規(guī)定，熟讀這些對試驗準備有很好的作用。比如有的會要求將試驗后樣品一塊寄發(fā)組織單位，有的實驗室如果不仔細閱讀的話很容易將測試后樣品立即處理掉，如果寄樣時在看見可就完了。
4、測試前的準備工作一定要做好，包括設(shè)備的校準、試運行等，有條件的情況下可以在正式測試前選擇一塊相仿的樣品進行一下預(yù)測試，這樣會將測試過程中的問題提前發(fā)現(xiàn)提前解決。對正式測試的操作有幫助。
三、能力驗證樣品處理
1、樣品測試過程中的判斷能力很重要，有時候我們在測試中往往會自以為是，為了保證測試過程中的準確操作最好是找一個經(jīng)驗豐富的作督察，發(fā)現(xiàn)問題及時解決，如果等操作完畢再發(fā)現(xiàn)問題的話可能會因為樣品的消耗而無法驗證結(jié)果；
2、定量項目，西林瓶內(nèi)樣品不可分割，應(yīng)全部用于檢測。一般參考書指導(dǎo)的是加40mL稀釋液制成40mL樣品。
3、定量項目樣品稀釋。指導(dǎo)書標明了稀釋范圍的，在稀釋范圍左右各加1個稀釋度進行；書上沒有稀釋范圍的，多做稀釋倍數(shù)，選擇合適的稀釋倍數(shù)計數(shù)（一般可稀釋至10-8）。
4、定量項目，除了要多做稀釋倍數(shù)外，同時同一稀釋度要多倒幾皿，從原理上來講，檢測過程屬于隨機抽樣檢查，平板越多，數(shù)據(jù)越接近真值?？紤]性價比，又不可能一直瘋狂一個稀釋度很多平板，所以能力驗證時候多倒幾皿，求好結(jié)果。
5、定性項目有一些重要步驟。
a、增菌及分離步驟尤其重要。選擇合適的增菌液和分離用培養(yǎng)基對目標菌的檢出非常關(guān)鍵，選擇兩種以上的增菌液和分離用培養(yǎng)基對菌株作直接分離和增菌后分離。
b、劃線分離十分重要，要把增菌液中的目標菌盡量多的表達出來，要分出單個菌落并盡可能多挑取可疑菌落，確保分離到目標菌。
c、生化試驗和血清學(xué)試驗以營養(yǎng)瓊脂平板上的純培養(yǎng)細菌為好。
四、實驗過程一定要做陰陽對照
陽性對照，是在試知驗中，檢驗培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件是否適合，如果在實驗中，陽性實驗沒有生長的話，那這個實驗是失敗的。陰性對照主道要是檢測培養(yǎng)基是否污染，在沒有加入任何東西培養(yǎng)時，培養(yǎng)基培養(yǎng)后還是會顯示陽性回結(jié)果，這就說明培養(yǎng)基滅菌不徹底，染菌答了，這樣也會影響實驗結(jié)果的。
五、培養(yǎng)基方面需要注意的地方
1、培養(yǎng)基配制充分混勻后再滅菌。
正確做法是用一部分水攪拌均勻后，再加入剩余水量，混勻后滅菌或分裝。
2、混菌法倒皿要充分混勻。
培養(yǎng)基倒完要左5圈右5圈（混勻速度一定要慢，目的是——避免培養(yǎng)基波動到二皿接觸的縫隙部分造成后續(xù)污染），找較水平位置冷卻凝固。
3、培養(yǎng)基要不要覆蓋問題。
覆蓋的目的是為了阻止活菌在培養(yǎng)基表層通過鞭毛移動，造成片狀生長，無法計數(shù)這一不利現(xiàn)象的發(fā)生。這里可以發(fā)揮主觀能動性-對于不運動的菌，可以不覆蓋，對于運動的菌覆蓋。
*總結(jié)一下：
a，長期檢測同一種樣品，不覆蓋并無蔓延現(xiàn)象，不覆蓋；長期檢測蔓延選擇了覆蓋，一直覆蓋。
b，未知樣品，進行覆蓋和不覆蓋的比對實驗，然后決定以后同樣的樣品是否需要覆蓋。養(yǎng)成經(jīng)驗。
c，能力驗證實驗，覆蓋和不覆蓋的都做，不要吝惜那么一點點培養(yǎng)基或耗材，畢竟能力驗證實驗做的漂亮才是實驗室（是室而不是人?。┠芰Φ木C合體現(xiàn)。
4、培養(yǎng)過程防止平皿干燥。
培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基可以倒的適當厚一些，比如25mL。培養(yǎng)箱底部接一個不銹鋼盆，裝上足量無菌水。
5、 實驗培養(yǎng)過程勤觀察。
微生物培養(yǎng)過程一般需要幾小時到幾十小時，要利用這段時間觀察培養(yǎng)箱及菌生長情況，比如溫度是否穩(wěn)定，培養(yǎng)室內(nèi)濕度如何等等，多思多看，準備預(yù)案。方有可能得到與盲樣一致的實驗結(jié)果。
原始記錄應(yīng)有條理、思路清晰,完整準確地記錄菌株鑒定檢驗的全過程,原始記錄要包含時間、試驗現(xiàn)象、試驗結(jié)果三個要素，方便試驗出現(xiàn)問題的查找。
結(jié)果判定
結(jié)果的判定一般根據(jù)設(shè)備操作，但是對于人為操作如評級、手工操作等結(jié)果可能會因為人員的差別而會有不同的偏差，這樣在判定時最好是找有經(jīng)驗的部門負責(zé)人或質(zhì)量專家一塊定奪，這樣的話會減少很多不必要的錯誤。
