食品微生物檢驗(yàn)志賀氏菌檢驗(yàn)常用培養(yǎng)基原理解析
發(fā)布時(shí)間：2020-10-15 瀏覽次數(shù)：8358
?培養(yǎng)基中除胰蛋白胨、葡萄糖外，加入新生霉素作抑菌劑，并加入少量的吐溫80作增溶劑，以幫助樣品的充分分散。
?41℃厭氧培養(yǎng)有助于抑制其它雜菌生長(zhǎng)。
2. 麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（MAC）
?利用膽鹽來(lái)抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的生長(zhǎng)；利用乳糖發(fā)酵，中性紅的顏色可把分解乳糖和不分解乳糖的細(xì)菌區(qū)分開(kāi)。
?志賀氏菌呈無(wú)色菌落，半透明，光滑，濕潤(rùn)，圓形，邊緣整齊或不齊。
麥康凱瓊脂培養(yǎng)（MAC）
3.木糖-賴(lài)氨酸-去氧膽酸鹽（XLD）瓊脂培養(yǎng)基
?脫氧膽酸鈉可以抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和部分大腸桿菌，多數(shù)志賀氏菌不能發(fā)酵木糖，木糖的添加可將志賀氏菌與其它菌株區(qū)別開(kāi)來(lái)，因此，志賀氏菌在XLD平板上呈現(xiàn)無(wú)色菌落，但少數(shù)發(fā)酵木糖的志賀氏菌在此平板上會(huì)被漏檢，XLD平板對(duì)宋內(nèi)志賀氏菌亦有輕度抑制作用。
?志賀氏菌通常呈粉紅色至無(wú)色，半透明，光滑，濕潤(rùn)，圓形，邊緣整齊或不齊菌落。
木糖-賴(lài)氨酸-去氧膽酸鹽（XLD）瓊脂菌落特征
?利用非志賀氏菌的特異性的酶，使其與酶底物結(jié)合形成不同顏色的菌落，而生化特性反應(yīng)不活躍的志賀氏菌經(jīng)22~28h培養(yǎng)后，則形成易于識(shí)別的白色-粉紅色（與培養(yǎng)基顏色相近）的菌落。
?志賀氏菌呈白色/清晰的菌落，大小約為1～3mm，周?chē)囵B(yǎng)基變紅。
?該培養(yǎng)基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例為10:10:1，只能利用葡萄糖的細(xì)菌，葡萄糖被分解產(chǎn)酸使斜面先變黃，但因量少，生產(chǎn)的少量酸。因接觸空氣而氧化，加之細(xì)菌生長(zhǎng)利用培養(yǎng)基中含氮物質(zhì)，生成堿性產(chǎn)物，故斜面后來(lái)又變紅。底部由于厭氧狀態(tài)，酸類(lèi)不被氧化，仍保持黃色。而發(fā)酵乳糖的細(xì)菌，則產(chǎn)生大量的酸，使整個(gè)培養(yǎng)基呈黃色。另外，因某些細(xì)菌能分解含硫氨基酸，生成硫化氫，硫化氫和培養(yǎng)基中的鐵鹽反應(yīng)生成黑色的硫化亞鐵沉淀。
三糖鐵
6.靛基質(zhì)試驗(yàn)
?某些細(xì)菌能分解蛋白胨中的色氨酸，生成吲哚。吲哚的存在可用顯色反應(yīng)表現(xiàn)出來(lái)。吲哚與對(duì)二甲基氨基苯醛結(jié)合，形成玫瑰吲哚，為紅色化合物。
?結(jié)果判讀：陽(yáng)性為滴加靛基質(zhì)試劑后液面立即變玫紅色； 陰性為滴加試劑后不變紅色。
靛基質(zhì)試驗(yàn)
7.尿素酶試驗(yàn)
?具有尿素酶的細(xì)菌分解培養(yǎng)基中的尿素，產(chǎn)生大量的氨，使培養(yǎng)呈堿性，酚紅指示劑在pH6.8時(shí)呈黃色，pH8.1呈粉紅色。
?結(jié)果判讀：陽(yáng)性為玫紅色； 陰性為淡橙紅色-淡黃色。
尿素酶試驗(yàn)
8.賴(lài)氨酸、鳥(niǎo)氨酸脫羧酶試驗(yàn)
?具有氨基酸脫羧酶的細(xì)菌，能分解氨基酸使其脫羧生成胺（賴(lài)氨酸→尸胺）和二氧化碳，使培養(yǎng)基變堿，使指示劑顯示出來(lái)。
?結(jié)果判讀：陽(yáng)性為試驗(yàn)管為綠色-藍(lán)綠色，對(duì)照管變黃色； 陰性為試驗(yàn)管和對(duì)照管均變黃色，或均不變色。
賴(lài)氨酸脫羧酶試驗(yàn)陽(yáng)性
9.糖（醇）發(fā)酵試驗(yàn)
?絕大多數(shù)細(xì)菌都能利用糖（醇）類(lèi)作為碳源和能源，但是它們?cè)诜纸馓牵ù迹┑哪芰ι嫌泻艽蟮牟町悾行┘?xì)菌能分解某種糖（醇）并產(chǎn)酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和氣體（如氫、甲烷、二氧化碳等）；有些細(xì)菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。酸的產(chǎn)生可利用指示劑來(lái)斷定。
?（指示劑為溴甲酚紫）結(jié)果判讀：陽(yáng)性為變黃色； 陰性為紫色。
甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)
10.β-半乳糖苷酶
?某些細(xì)菌可產(chǎn)生b-半乳糖苷酶，能分解鄰硝基酚-b半乳糖苷（ONPG），生成黃色的鄰硝基酚。
?結(jié)果判讀：陽(yáng)性為黃色； 陰性為不變色-淡黃色。
ONPG生化管
11. 葡萄糖銨試驗(yàn)
?鑒別細(xì)菌利用銨鹽作為唯一氮源并分解葡萄糖的試驗(yàn)。溴麝香草酚藍(lán)是指示劑，產(chǎn)酸時(shí)培養(yǎng)基由綠色變黃色。
?結(jié)果判讀：陽(yáng)性為黃色； 陰性為綠色。
葡糖糖銨利用試驗(yàn)
12. 西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基
?細(xì)菌能利用檸檬酸鹽作為唯一的碳源，能在除檸檬酸鹽外不含其他碳源的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，分解檸檬酸鹽生成碳酸鈉，使培養(yǎng)基變堿性。
?結(jié)果判讀：陽(yáng)性為藍(lán)綠-藍(lán)色； 陰性為綠色。
西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基試驗(yàn)
13. 粘液酸鹽試驗(yàn)
?某些細(xì)菌能利用粘液酸鹽，分解產(chǎn)酸，使培養(yǎng)基中的溴麝香草酚藍(lán)變黃色。
?結(jié)果判讀：陽(yáng)性為黃色； 陰性為綠色-藍(lán)綠色。
粘液酸鹽試驗(yàn)
