微生物菌種保藏注意事項
發(fā)布時間：2019-11-11 瀏覽次數(shù)：4236
微生物菌種保藏主要是根據(jù)菌種的生理、生化特性，人工創(chuàng)造條件使菌體的代謝活動處于休眠狀態(tài)。保藏時，一般利用菌種的休眠體(孢子、芽孢等)，創(chuàng)造最有利于休眠狀態(tài)的環(huán)境條件，如低溫、干燥、隔絕空氣或氧氣、缺乏營養(yǎng)物質(zhì)等，使菌體的代謝活性處于最低狀態(tài)，同時也應(yīng)考慮到方法經(jīng)濟(jì)、簡便。由于微生物種類繁多，代謝特點各異，對各種外界環(huán)境因素的適應(yīng)能力不一致，一個菌種選用何種方法保藏較好，要根據(jù)具體情況而定。
微生物菌種保藏要獲得較好的效果，需注意如下三個方面：
1. 微生物菌種在保藏前所處的狀態(tài)
絕大多數(shù)微生物的菌種均保藏其休眠體，如孢子或芽孢。保藏用的孢子或芽孢等要采用新鮮斜面上生長豐滿的培養(yǎng)物。菌種斜面的培養(yǎng)時間和培養(yǎng)溫度影響其保藏質(zhì)量。培養(yǎng)時間過短，保存時容易死亡；培養(yǎng)時間長，生產(chǎn)性能衰退。一般以稍低于最適生長溫度下培養(yǎng)至孢子成熟的菌種進(jìn)行保存，效果較好。
2. 微生物菌種保藏所用的基質(zhì)
斜面低溫保藏所用的培養(yǎng)基，碳源比例應(yīng)少些，營養(yǎng)成分貧乏些較好，否則易產(chǎn)生酸，或使代謝活動增強(qiáng)，影響保藏時間。砂土管保藏需將砂和土充分洗凈，以防其中含有過多的有機(jī)物，影響菌的代謝或經(jīng)滅菌后產(chǎn)生一些有毒的物質(zhì)。冷凍干燥所用的保護(hù)劑，有不少經(jīng)過加熱就會分解或變性的物質(zhì)，如還原糖和脫脂乳，過度加熱往往形成有毒物質(zhì)，滅菌時應(yīng)特別注意。
3. 操作過程對細(xì)胞結(jié)構(gòu)的損害
冷凍干燥時，凍結(jié)速度緩慢易導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)形成較大的冰晶，對細(xì)胞結(jié)構(gòu)造成機(jī)械損傷。真空干燥程度也將影響細(xì)胞結(jié)構(gòu)，加入保護(hù)劑就是為了盡量減輕冷凍干燥所引起的對細(xì)胞結(jié)構(gòu)的破壞。細(xì)胞結(jié)構(gòu)的損傷不僅使菌種保藏的死亡率增加，而且容易導(dǎo)致菌種變異，造成菌種性能衰退。
