產(chǎn)氣莢膜梭菌檢驗注意事項
發(fā)布時間：2019-08-29 瀏覽次數(shù)：4981
產(chǎn)氣莢膜梭菌為人類氣性壞疽的主要病原菌。1892年，美國病理學(xué)家W.H.韋爾奇等自一尸體分出本菌，因而又稱魏氏梭菌。菌體較大，大小為(0.9～1.3)×(3.0～9.0)微米，無鞭毛，有莢膜。芽孢橢圓形,位于次級端。厭氧不嚴(yán)格。菌落直徑2～5毫米，在血平板上會出現(xiàn)β溶血環(huán)，并出現(xiàn)雙溶血帶。糖發(fā)酵能力強，產(chǎn)酸產(chǎn)氣。本菌的特征之一是在牛乳培養(yǎng)基中呈暴烈發(fā)酵現(xiàn)象。本菌廣泛存在于土壤、 人和動物的腸道以及動物和人類的糞便中，會散發(fā)臭味。
長期以來產(chǎn)氣莢膜梭菌一直僅被認(rèn)為是一種創(chuàng)傷感染病原菌，直到1943年，才證實它可經(jīng)過消化道對人產(chǎn)生危害，為食物中毒病原菌。作為重要的病原菌，在食品及水的微生物檢驗標(biāo)準(zhǔn)中均有涉及，如GB 4789.23-2012、GB 8538-2016 ，在微生物實驗室產(chǎn)氣莢膜梭菌檢驗實驗過程中，應(yīng)注意以下四點：
1、分離本菌采用TSC瓊脂（GB 4789.13-2012），添加樣品并傾注培養(yǎng)基后，需注意在培養(yǎng)基凝固后在表面再傾注一層培養(yǎng)基，使得樣品完全被培養(yǎng)基覆蓋。若產(chǎn)氣莢膜梭菌暴露在外界，則可能導(dǎo)致其菌落不顯黑色。
產(chǎn)氣莢膜梭菌ATCC13124
2、進行暴烈牛乳發(fā)酵實驗時，含鐵牛乳培養(yǎng)基只煮沸溶解不滅菌的話，能有效提前暴烈發(fā)酵的時間。此外，接種菌液時，菌液濃度需較高，并且接種于培養(yǎng)基中下部，不能接種于培養(yǎng)基表面；因暴烈發(fā)酵時培養(yǎng)基會上升，因此培養(yǎng)及表面到試管口應(yīng)留一定空隙，防止實驗過程中培養(yǎng)基溢出。
圖左為滅菌培養(yǎng)基，右圖為未滅菌培養(yǎng)基
3、乳糖明膠在溫度較高之時呈現(xiàn)液態(tài)，此時接種接種FTG培養(yǎng)物至乳糖明膠生化管當(dāng)中即可。記得是在培養(yǎng)結(jié)束后將乳糖明膠放置4度1小時，再觀察培養(yǎng)基的液化情況，而不是在培養(yǎng)基結(jié)束后立刻觀察。
陽性 陰性
4、緩沖動力硝酸鹽實驗，滴加硝酸鹽試劑甲、乙液以檢查亞硝酸鹽的存在。15 min 內(nèi)出現(xiàn)紅色者，表明硝酸鹽被還原為亞硝酸鹽；如果不出現(xiàn)顏色變化，則加少許鋅粉，放置10 min，出現(xiàn)紅色者，表明該菌株不能還原硝酸鹽。如果沒有出現(xiàn)顏色，說明原菌已經(jīng)將硝酸鹽還原至氮氣甚至銨鹽。
產(chǎn)氣莢膜梭菌ATCC13124
