微生物檢測凍干質(zhì)控菌種生孢梭菌ATCC19404使用說明
1、 復(fù)蘇生孢梭菌質(zhì)控菌種前應(yīng)準(zhǔn)備適于該菌種生長的培養(yǎng)基和培養(yǎng)設(shè)備,所有操作均應(yīng)在符合生物安全保護(hù)及無菌條件下進(jìn)行。
2、 啟開生孢梭菌質(zhì)控菌種前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面。在無菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開塑蓋,撕開鋁蓋,打開西林瓶膠塞,加入復(fù)蘇液(購買菌株包裝中提供),將生孢梭菌凍干菌種(干粉)制成懸浮液,然后用無菌滴管或移液器吸取適量,移至非選擇性固體培養(yǎng)基平板(或液體培養(yǎng)基)上(除特殊情況或特別推薦外),按推薦的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)和傳代保存(詳見附表“凍干菌種的復(fù)蘇培養(yǎng)和傳代保存”)。
3、 有個別凍干菌種(如弧菌屬、乳桿菌屬等)復(fù)蘇速度較慢,可按2操作后,同時將菌懸液置推薦的培養(yǎng)條件培養(yǎng)過夜,再選用適合該菌種生長的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行分離,操作見4。
4 、培養(yǎng)后觀察菌種的生長情況,并檢查其純度,如發(fā)現(xiàn)純度不能滿足要求時,應(yīng)選用適合生孢梭菌生長的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行分離,并按推薦的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)后觀察目標(biāo)菌的菌落特征與生化特征,挑取典型菌落做純培養(yǎng)后再使用。
5、 本品為一次性用品,開啟之后不宜反復(fù)使用或保存,暫不使用時,建議4℃保藏。
6、 復(fù)蘇后的菌種一般宜傳代(如:斜面?zhèn)鞔?~3次后使用,菌種傳代5次后建議棄置。
7 、生孢梭菌質(zhì)控菌種購買后應(yīng)在保質(zhì)期內(nèi)使用。
注):購買后如發(fā)現(xiàn)菌種異常或污染等情況,請在購買之日起1個月內(nèi)與我們聯(lián)系。
凍干菌種生孢梭菌復(fù)蘇示意圖:
附表 凍干質(zhì)控菌種的復(fù)蘇培養(yǎng)和傳代保存
質(zhì)控菌種名稱 | 復(fù)蘇液 (包裝中提供) | 復(fù)蘇培養(yǎng)基 | 培養(yǎng)條件 | 保存溫度 | 轉(zhuǎn)接 頻率 | 備注 |
大腸埃希氏菌、沙門氏菌、志賀氏菌 | 腦心浸液培養(yǎng)基 | 營養(yǎng)瓊脂(022020) | 24h~48h | 2~ | 一個月 |
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阪崎腸桿菌、陰溝腸桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌 | ||||||
肺炎克雷伯氏菌、粘質(zhì)沙雷伯氏菌 | ||||||
變形桿菌、弗氏檸檬酸桿菌 | ||||||
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 | ||||||
葡萄球菌、微球菌、馬紅球菌、芽胞桿菌 | ||||||
假單胞菌、氣單胞菌屬 | 腦心浸液培養(yǎng)基 | 營養(yǎng)瓊脂(022020) | 24h~48h | 一個月 |
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熒光假單胞菌 | 腦心浸液培養(yǎng)基 | 營養(yǎng)瓊脂(022020) | 25℃-30℃ 24h~48h | 一個月 |
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腸球菌、鏈球菌 | 腦心浸液培養(yǎng)基 | 血平板(024070) | 24h~48h | 2~ | 半個月 |
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李斯特氏菌 | 腦心浸液培養(yǎng)基 | 胰蛋白胨大豆酵母浸膏瓊脂 (TSA-YE) (026020) | 24h~48h | 2~ | 一個月 |
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梭菌 | 腦心浸液培養(yǎng)基 | 皰肉牛肉粒肉湯(027140)或梭菌増菌肉湯(027145)或哥倫比亞血平板(CP0160) | 48h~72h厭氧培養(yǎng) | 2~8℃ 厭氧環(huán)境 | 半個月 | 接種皰肉牛肉粒肉湯后加無菌液體石蠟(029110)高約1cm。 |
霍亂弧菌、擬態(tài)弧菌 | 堿性蛋白胨水 | 堿性瓊脂(025040) | 24h~48h | 一個月 |
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其它弧菌(副溶血性弧菌、創(chuàng)傷弧菌、河流弧菌、溶藻弧菌等) | 3%NaCl堿性蛋白胨水 | 3%NaCl 營養(yǎng)瓊脂 或3%NaCl TSA (025043) | 24h~48h | 一個月 |
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霉菌、念珠菌、酵母菌 | 沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基 | 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA)(021050) | 2d~5d | 2~ | 兩個月 |
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空腸彎曲菌 | 布氏肉湯 | 血平板(024070) 42± | 42± | 2~ 微需氧 | 一周 |
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雙歧桿菌 | TPY肉湯 | 雙歧桿菌瓊脂(027330) | 48h~72h厭氧培養(yǎng) | 2~ 厭氧環(huán)境 | 一周 |
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其它乳酸菌(乳酸桿菌、乳酸桿菌亞種、嗜熱乳酸鏈球菌) | MRS肉湯或脫脂乳溶液 | 滅菌脫脂乳或 MRS瓊脂(027315) | 24h~48h | 2~ | 一周 |
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嗜血桿菌屬、奈瑟氏菌屬 | 腦心浸液培養(yǎng)基 | 巧克力平板培養(yǎng)基 (普通)(029032) | 48h~72h 5~10%CO2環(huán)境 | 2~ 5~10%CO2 環(huán)境 | 一周 |
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軍團(tuán)菌 | 腦心浸液培養(yǎng)基 | BCYE平板 (CP0020) | 4d~7d | 2~ | 一個月 | 轉(zhuǎn)接時用一次性接種環(huán),不能使用酒精燈;如使用平板轉(zhuǎn)接,培養(yǎng)時建議用牛皮紙或報紙包好,避免平板失水變干。 |