微生物檢測(cè)凍干質(zhì)控菌種銅綠假單胞菌 ATCC9027使用說(shuō)明書(shū)
1 復(fù)蘇菌種前應(yīng)準(zhǔn)備適于該菌種生長(zhǎng)的固體、液體培養(yǎng)基和培養(yǎng)設(shè)備，所有操作均應(yīng)在符合生物安全保護(hù)及無(wú)菌條件下進(jìn)行。
2 啟開(kāi)菌種銅綠假單胞菌 ATCC9027前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面。在無(wú)菌條件下，按鋁蓋上的箭頭方向打開(kāi)塑蓋，撕開(kāi)鋁蓋，打開(kāi)西林瓶膠塞，加入0.3mL左右的配套液體培養(yǎng)基，用無(wú)菌滴管反復(fù)吹吸，將凍干菌種溶解成為懸液，然后用無(wú)菌滴管或接種環(huán)移至斜面、平板或液體培養(yǎng)基，并連同剩余菌懸液的西林瓶一起放置于36℃培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。(菌種與培養(yǎng)和保存方法對(duì)應(yīng)表見(jiàn)附表1，培養(yǎng)基、培養(yǎng)方法和傳代保存方法見(jiàn)附表2)。
3 次日觀察菌種的生長(zhǎng)情況，如未生長(zhǎng)，應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)24h，或吸取培養(yǎng)之后的菌懸液中再次接種培養(yǎng)基，培養(yǎng)24h觀察。
4 菌株為一次性使用品，開(kāi)啟之后不能反復(fù)使用或保存，暫不開(kāi)啟的菌種應(yīng)在4℃保藏。
5 復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用，建議菌種使用5代后棄用。
注)：購(gòu)買(mǎi)后請(qǐng)盡量及時(shí)使用凍干菌種，如發(fā)現(xiàn)菌種不活或污染等情況，請(qǐng)?jiān)谫?gòu)買(mǎi)之日起1個(gè)月內(nèi)與我們聯(lián)系。
凍干菌種銅綠假單胞菌 ATCC9027復(fù)蘇示意圖：
附表 凍干質(zhì)控菌種的復(fù)蘇培養(yǎng)和傳代保存
名稱(chēng) 復(fù)蘇液 （包裝中提供） 復(fù)蘇培養(yǎng)基 培養(yǎng)條件 保存溫度 轉(zhuǎn)接 頻率 備注 大腸埃希氏菌、沙門(mén)氏菌、志賀氏菌 腦心浸液培養(yǎng)基 營(yíng)養(yǎng)瓊脂（022020） 24h～48h 2~ 一個(gè)月 阪崎腸桿菌、陰溝腸桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌 肺炎克雷伯氏菌、粘質(zhì)沙雷伯氏菌 變形桿菌、弗氏檸檬酸桿菌 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 葡萄球菌、微球菌、馬紅球菌、芽胞桿菌 假單胞菌、氣單胞菌屬 腦心浸液培養(yǎng)基 營(yíng)養(yǎng)瓊脂（022020） 24h～48h 一個(gè)月 熒光假單胞菌 腦心浸液培養(yǎng)基 營(yíng)養(yǎng)瓊脂（022020） 25℃-30℃ 24h～48h 一個(gè)月 腸球菌、鏈球菌 腦心浸液培養(yǎng)基 血平板（024070） 24h～48h 2~ 半個(gè)月 李斯特氏菌 腦心浸液培養(yǎng)基 胰蛋白胨大豆酵母浸膏瓊脂 (TSA-YE) (026020) 24h～48h 2~ 一個(gè)月 梭菌 腦心浸液培養(yǎng)基 皰肉牛肉粒肉湯（027140）或梭菌増菌肉湯（027145）或哥倫比亞血平板（CP0160） 48h～72h厭氧培養(yǎng) 2~8℃ 厭氧環(huán)境 半個(gè)月 接種皰肉牛肉粒肉湯后加無(wú)菌液體石蠟（029110）高約1cm。 霍亂弧菌、擬態(tài)弧菌 堿性蛋白胨水 堿性瓊脂（025040） 24h～48h 一個(gè)月 其它弧菌(副溶血性弧菌、創(chuàng)傷弧菌、河流弧菌、溶藻弧菌等) 3％NaCl堿性蛋白胨水 3％NaCl 營(yíng)養(yǎng)瓊脂 或3％NaCl TSA （025043） 24h～48h 一個(gè)月 霉菌、念珠菌、酵母菌 沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA)(021050) 2d～5d 2~ 兩個(gè)月 空腸彎曲菌 布氏肉湯 血平板（024070） 42± 42± 2~ 微需氧 一周 雙歧桿菌 TPY肉湯 雙歧桿菌瓊脂（027330） 48h～72h厭氧培養(yǎng) 2~ 厭氧環(huán)境 一周 其它乳酸菌(乳酸桿菌、乳酸桿菌亞種、嗜熱乳酸鏈球菌) MRS肉湯或脫脂乳溶液 滅菌脫脂乳或 MRS瓊脂（027315） 24h～48h 2~ 一周 嗜血桿菌屬、奈瑟氏菌屬 腦心浸液培養(yǎng)基 巧克力平板培養(yǎng)基 (普通)(029032) 48h～72h 5～10%CO2環(huán)境 2~ 5~10%CO2 環(huán)境 一周 軍團(tuán)菌 腦心浸液培養(yǎng)基 BCYE平板 (CP0020) 4d～7d 2~ 一個(gè)月 轉(zhuǎn)接時(shí)用一次性接種環(huán)，不能使用酒精燈；如使用平板轉(zhuǎn)接，培養(yǎng)時(shí)建議用牛皮紙或報(bào)紙包好，避免平板失水變干。
