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071821 單核增生李斯特氏菌生化鑒定盒(SN標準) 13種×10次

英文名稱:

貨 號 :071821

規(guī) 格 :13種×10次/盒

用途:用于單核增生性李斯特氏菌常見的13項生化反應。(SN標準)

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細菌新型生化鑒定管使用說明
   ――071821 單核增生李斯特氏菌生化鑒定盒(13種×10次)(SN標準) 

一)單核增生李斯特氏菌生化鑒定盒(SN標準) 整套試劑及用品

定生化反應的13種試劑(表1)、0.85%無菌生理鹽水10瓶、0.5 McFarland的濁度管1瓶、一次性吸管10支。 

二)生化管的使用方法

開啟西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在無菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋,撕開鋁蓋,打開西林瓶膠塞(如圖1)。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。

三)單核增生李斯特氏菌生化鑒定盒的詳細使用方法

挑取選擇性培養(yǎng)基上的可疑菌落接種TSA-YE瓊脂平板上于35℃純培養(yǎng)24h后進行菌落顏色、鏡檢等項目使用。   

藍色菌落檢驗:用45°光斜射TSA-YE瓊脂平板,菌落呈藍灰色到藍色。用標準菌株作為陽性對照。將純培養(yǎng)后的菌落接種于TSB-YE肉湯,35℃培養(yǎng)24h,供生化等項目檢驗使用。

典型運動鏡檢:挑取在TSA-YE瓊脂平板上生長良好的菌落于潔凈載玻片上,李斯特氏菌為革蘭氏陽性小桿菌,大小為0.4~0.5μm×0.5~2.0μm;用生理鹽水制成菌懸液,在油鏡或相差顯微鏡下觀察,該菌出現(xiàn)輕微旋轉或翻滾樣的運動。

過氧化氫酶試驗:挑取TSA-YE平板上的菌落于潔凈載玻片上,滴加1滴3%的過氧化氫(H2O2)溶液,李斯特氏菌呈過氧化氫酶陽性反應。

溶血試驗:從每個TSA-YE瓊脂平板上至少挑取2個菌落刺種血平板,35℃培養(yǎng)24h~48h。

生化鑒定:將TSB-YE肉湯培養(yǎng)物接種于每種微量西林瓶內(nèi)。將已接種的西林瓶再套上膠塞,一般采用全加塞(如圖2左兩瓶所示),特殊情況在下表注明采用半加塞(如圖2右兩瓶所示),直立于內(nèi)托的凹槽內(nèi)(如圖2),或放置于合適的瓶架中,于35-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),結果觀察見表1。

注意:如有特殊的接種方式、培養(yǎng)時間或培養(yǎng)方式,請詳見每種生化鑒定管附帶的使用說明。

西林瓶使用方法

表1
產(chǎn)品名稱結果判定培養(yǎng)時間使用說明
陽性陰性
硝酸鹽(還原)深紅色略帶淡粉紅色5d西林瓶半加塞(如圖2右兩瓶所示)培養(yǎng)后加硝酸鹽還原試劑甲、乙液各2滴,混勻,立即觀察結果。
3%過氧化氫溶液劇烈起泡無氣泡--直接滴加在玻片的新鮮菌苔涂片上。
葡萄糖、麥芽糖、甘露醇、木糖、鼠李糖黃色紫色24h—5d 
葡萄糖磷酸鹽胨水(MR)紅色不變色48h西林瓶半加塞(如圖2右兩瓶所示)培養(yǎng)后加MR試劑2-3滴,立即觀察結果。
葡萄糖磷酸鹽胨水(VP)紅色不變色48h西林瓶半加塞(如圖2右兩瓶所示)培養(yǎng)后依次加入8滴VP試劑甲液及4滴乙液,混勻,再培養(yǎng)10-20分鐘觀察結果。
尿素桃紅色淡橙紅色24h—5d打開西林瓶膠塞后,向西林瓶中加入所配備的1.5mL/瓶的無菌水,充分溶解。再用接種針挑取新鮮菌苔直接接種于西林瓶內(nèi)。接種后,置于35-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),逐日觀察結果。
七葉苷棕黑色不變色24h—5d 
SIM培養(yǎng)基擴散生長,成傘狀無擴散生長25℃,2—5d用接種針挑取新鮮菌苔穿刺,豎立培育。
三糖鐵瓊脂產(chǎn)氣有氣泡無氣泡24h-5d用接種針挑取新鮮菌苔穿刺,穿刺完畢后在斜面上劃“之”字形接種,豎立培育。西林瓶半加塞(如圖2右兩瓶所示)后豎立培育。
分解蔗糖或乳糖斜面和底層變黃色不變色
分解葡萄糖底層變黃,斜面不變色或者紅色加深不變色
產(chǎn)H2S變黑色不變色
備注:本鑒定盒是按照環(huán)凱產(chǎn)品目錄中的品種成份從左到右的順序擺放。

四)單核細胞增生李斯特氏菌的主要生化特性及有關菌的區(qū)別見表2。(只供參考)

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