注:本產(chǎn)品現(xiàn)已停售,可用公司新研發(fā)生產(chǎn)的 HKI002 EasyID沙門氏菌生化鑒定試劑盒 10test 進(jìn)行替代, EasyID沙門氏菌生化鑒定試劑盒 的產(chǎn)品鏈接地址:http://www.knowper.cn/show/20850.html 。
細(xì)菌新型生化鑒定管使用說明
―― 071740 沙門氏菌生化鑒定盒(10種×10次)管
一)整套試劑及用品
鑒定生化反應(yīng)的10種試劑(表1)、10瓶0.85%無菌生理鹽水、1瓶0.5 McFarland的濁度管、10支一次性吸管。
二)生化管的使用方法
開啟西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在無菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋,撕開鋁蓋,打開西林瓶膠塞(如圖1)。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
注意:氰化鉀生化管,應(yīng)盡量將膠塞套緊,以免氰化鉀揮發(fā)造成假陽性!
三)沙門氏菌生化鑒定盒的詳細(xì)使用方法
沙門氏菌為需氧的革蘭氏陰性無芽胞桿菌,有動(dòng)力,有周鞭毛(但有無動(dòng)力的變種),最適溫度為37℃,最適pH為7.2~7.6,在固體培養(yǎng)基上37℃ 24h菌落可呈中等大小,光滑,圓形,濕潤,隆起,在液體培養(yǎng)基內(nèi)生長均勻渾濁。挑取平板分離的可疑菌落直接進(jìn)行三糖鐵瓊脂和營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng),將可疑菌落置于已配備的無菌生理鹽水,與0.5 McFarland的濁度管比濁,將菌懸液制備成0.5McFarland ( 約108cfu/mL ),用吸管吸取2滴(約0.06mL)菌懸液加入每種微量生化管內(nèi)。將已接種的西林瓶再套上膠塞,一般采用全加塞(如圖2左兩瓶所示),特殊情況在下表注明采用半加塞(如圖2右兩瓶所示),直立于內(nèi)托的凹槽內(nèi)(如圖2),或放置于合適的瓶架中,于35-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),結(jié)果觀察見表1。
注意:如有特殊的接種方式、培養(yǎng)時(shí)間或培養(yǎng)方式,請(qǐng)?jiān)斠娒糠N生化鑒定管附帶的使用說明。
四)沙門氏菌生化鑒定特征
自選擇性瓊脂平板上直接挑取數(shù)個(gè)可疑菌落,分別接種三糖鐵瓊脂在三糖鐵瓊脂內(nèi),腸桿菌科常見屬種的反應(yīng)結(jié)果見表2。
蛋白胨水(供靛基質(zhì)試驗(yàn))、尿素瓊脂(PH7.2)、氰化鉀利用試驗(yàn)可在與三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)同時(shí)進(jìn)行,也可在三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)出結(jié)果后,再從營養(yǎng)瓊脂平板上挑取可疑菌落純物進(jìn)行測(cè)試,按表3判定結(jié)果。將已挑菌落的平板儲(chǔ)存于2℃~5℃或室溫至少保留24h,以備必要時(shí)復(fù)查。
反應(yīng)序號(hào)A1:典型反應(yīng)判定為沙門氏菌屬。如尿素、氰化鉀和賴氨酸3項(xiàng)中有1項(xiàng)異常,按表4可判定為沙門氏菌。如有2項(xiàng)異常為非沙門氏菌。
反應(yīng)序號(hào)A2:補(bǔ)做甘露醇和山梨醇試驗(yàn),沙門氏菌靛基質(zhì)陽性變體兩項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果均為陽性,但需要結(jié)合血清學(xué)鑒定結(jié)果進(jìn)行判定。
反應(yīng)序號(hào)A3:補(bǔ)做ONPG試驗(yàn),ONPG陰性為沙門氏菌,同時(shí)賴氨酸脫羧酶陽性,甲型副傷寒沙門氏菌為賴氨酸脫羧酶陰性。